一、原理 定量的抗原加入到含有一定量的相应抗体的琼脂糖凝胶中，在电场作用下，引起抗原抗体的迁移和相互反应，当比例合适时形成肉眼可见的沉淀峰，由于电泳继续进行，样品孔不断有抗原移向抗原抗体复合物的沉淀峰，因抗原过剩使沉淀溶解而在前面又形成新的抗原抗体复合物的沉淀峰。如此反复向前，直到再无游离抗原而反应终止，形成上行火箭状的沉淀峰，其沉淀峰高度和抗原的浓度成正比...
随着细胞分子生物学的进步，已经基本明确了在 动脉粥样硬化 时各种细胞相互剌激与应答的关系。病变时期，单核细胞、巨噬细胞在向内皮下层入侵的同时摄取变性的LDL使其自身泡沫化。淋巴细胞则分泌多种生物活性物质，加速 动脉粥样硬化 进程。 一、巨噬细胞与 动脉粥样硬化 进程的关系 动脉粥样硬化 与胆固醇代谢有关已成共识，这些脂质沉积于动脉管壁、巨噬细胞吞噬这些脂质并...
...胞氧化成氧化LDL，可通过清道夫受体被巨噬细胞摄取，形成泡沫细胞，氧化LDL还能吸引血单核细胞粘附于血管壁，对内皮细胞有毒性作用等，从而促进粥样斑块形成。这些研究无疑阐明了巨噬细胞的清道夫受体在粥样斑块形成机制中起有重要的作用，另一方面，也推测巨噬细胞通过清道夫受体清除细胞外液中的修饰LDL，尤其是氧化的LDL，是机体的一种防御功能。可清除血管壁过多脂质；清...
...在机体生长、发育、代谢发挥着不可取代的作用。由脂肪酸转化的前列腺素，而前列腺素近年来倍受重视，它对心血管系统的作用表现为增加心肌收缩性，降低动脉血压，同时伴随着血管扩张和增加血管通透性，前列腺素对大脑皮层有镇定和安定效应。前列腺素还能使 支气管哮喘 缓解而被用于治疗 哮喘 。另外，鞘磷脂、糖鞘酯是神经组织特有的物质，其作用不可忽视。还有一些维生素，如类萜维生...
...完全佐剂或完全佐剂），1周后再免疫1次。待最后一次免疫后的7～10天，取静脉血 测试 抗体效价（试血），效价达到要求后即可一次性放血，采用颈动脉放血，得抗血清。笔者采用此法先后免疫成功ApoAⅠ、AⅡ、B 100 和E的抗血清。 （3）抗血清的保存 免疫成功的动物放血过程，所有用具均严格消毒，并按无菌操作方式进行放血。抗血清的防腐剂以0.05%叠氮钠为宜；也...
...制备（从略）。 2．抗体的标记：基本原理是将抗体与标记物以共价键结合。 3．组织取材。 因为抗原组织容易降解和扩散，取材要及时和低温操作，取动脉壁冰冻切成4～8μm，贴于玻片上立即干燥，用95%乙醇固定15min，然后用0.5mol/l pH7.4 BPS洗1次。 4．抗体染色 抗体染色是利用抗原与抗体特异性结合的原理，37℃30～60min，间接法结合第二...
...ml，此为应用液。 （2）胆固醇酶法测定试剂（同第十五章） （3）胆固醇标准参考液（同第十五章） 3．操作 （1）空腹12h，抽取静脉血，不抗凝，分离血清备测。于24h内操作完毕。 （2）其他操作同前。 4．注意事项 （1）室温以15～20℃为宜，＜15℃或＞30℃时应增加或减少静置时间，离心转速要恒定一致。 （2）离心沉淀后，要立即吸出上清进行测定，否则结...
...ex）等种类。 由于凝胶过滤技术设备简单、操作方便，重复性能好和样品得率高等特点。广泛应用于生命科学领域，如蛋白质、核酸、多糖氨基酸、激素和抗生素等物质的分离纯化。凝胶层析在载脂蛋白的分离纯化中，属于使用最多的技术手段。 凝胶过滤装置种类很多，其基本操作过程大同小异，操作步骤主要有：①凝胶种类的选择，按被分离物的性质及分子量大小而定；②凝胶柱的制备；③加样与...
一、血管壁细胞提取 1．以无菌术取动脉，立即放入4℃、5%水解乳蛋白Hanks液中漂洗，除去凝血。 2．用小镊剔除外膜纤维、脂肪组织，用剪子沿血管壁纵向剪开血管，用Hanks液洗2次。 3．可先分开内皮细胞和平滑肌细胞，也可不区分两类细胞，将血管切成小块，放入2%胶原酶，温浴12～18h。 4．梯度液选择40%～70%，40%梯度液应是4份precoll、1...
家族性高胆固醇血症 是由于遗传因素导致LDL受体（LDL-R）缺陷，从而引起LDL代谢障碍。其症状表现为在幼儿期即可形成 动脉粥样硬化 ，可早于10岁左右发生心肌梗塞。 由于该病是LDL-R基因突变引发的疾病，所以很难用前述的方法制作成功动物模型，而是通过育种学和遗传学的方法获得的。1974年渡边从日本白色种兔发现一只 高脂血症 的变种，经传代筛选于1979...
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