五、病毒的快速诊断 免疫细胞化学为病毒感染性疾病的快速诊断开创了一个广阔的道路(参见表16-2),最先用免疫荧光法作流感病毒快速诊断,证明有较高的特异性。随后,对 流行性乙型脑炎 ,脊髓灰白质炎、呼吸道和 肺炎 腺病毒、 疱疹 病毒等进行了临床快速诊断,提高了诊治效果。近年,利用免疫细胞化学方法检测EB病毒IgA抗体诊断 鼻咽癌 取得突破性成果,对于早期诊治
由于抗原、标记抗原和抗体三者加样次序不同,而出现两种加样程序,分述如下: (一)平衡饱和加样程序 1.基本原理所谓平衡饱和,是指抗原和抗体反应达到再不结合,也不解离的平衡状态,称为饱和状态,即平衡饱和。所以,有人称此为饱和分析法。这意味着抗原或被测抗原、标记抗原、抗体三者一起温育。 2.加样程序一般先加标准物或被测样品,再加抗血清,最后加标记物。这样的顺序是
癌胚抗原(carcinoembryonic antigen, CEA)是人们熟悉的肿瘤标记物之一。最早是从 结肠癌 中分离的一种糖蛋白,分子量为180~200lkD,存在于细胞膜上,故易于脱入人体液之中。因此,临床上常常测定血清中的CEA水平帮助建立肠癌的诊断。但应该指出的是,随着大量资料的积累,已发现很多非恶性病亦可有血浆CEA水平的升高,包括肝脏、消化道
甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein, AFP)是含有一条多肽链、分子量为70kD的糖蛋白。因在早期 脐带 血中被检出而得名。如CEA一样,AFP也是研究得最为充分的肿瘤标记物之一,在筛选高危肝细胞癌患者中已经得到了成功的应用。然而,AFP的升高并不只是原发性肝细胞癌所特有,也可见于生殖细胞肿瘤,以卵黄囊恶性肿瘤和睾丸胚胎性癌最多见。同时还应指出,在
1.超急性排斥反应 发生于移植后几分钟至几小时,临床表现为 高热 、腰痛、 无尿 。光镜可见肾小球和间质的毛细血管内大量中性白细胞集聚,继而形成血栓并有血管壁纤维素样坏死。电镜可见肾小球毛细血管内有纤维素,内皮细胞剥落,基底膜疏松肿胀。荧光可见lgG、lgM、和C 3 沿肾小球毛细血管壁呈线形沉积,间质小动脉壁有纤维素沉积。 2.加速性排斥反应(严重急性排斥
荧光是指一个分子或原子吸收了给予的能量后即刻引起发光,停止能量供给,发光也瞬时停止(一般持续10-7~10-8s)。可以产生明亮荧光的染料物质,称荧光色素。目前主要常用的荧光色素有以下3种:
郎格罕细胞(Langerhans cell, LC)是起源于骨髓和脾脏的一种树枝状细胞。LC主要存在于表皮和毛囊上皮内,通常位于表皮基底层上方。但真皮内,口腔、扁桃体、咽部、食管和阴道的粘膜中以及淋巴结、脾脏和胸腺等部位也可见LC。表皮内LC可以游走、穿越其基底膜。皮肤移植时,移植物中大部分原有的LC可迅速被宿主LC所替换,只有一小部分LC能存在很久。 LC
为了保证免疫荧光细胞化学染色的准确性,排除某些非特异性染色,必须在初次试验时进行以上对照试验: 1.直接法 需设下述对照试验 (1)标本自发荧光对照:标本只加PBS或不加PBS,缓冲甘油封片,荧光显微镜观察应呈阴性荧光(无与特异性荧光相似的荧光)。 (2)抑制试验:可分为二步法和一步法。 ①二步抑制法:标本先加未标记的特异性抗体,再加标记荧光抗体,结果应呈阴
1.染色 切片经固定后,滴加经稀释至染色效价如1:8或1:16的荧光抗体(如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等),在室温或37℃染色30min,切片置入能保持潮湿的染色盒内,防止干燥。 2.洗片 倾去存留的荧光抗体,将切片浸入pH7.4或pH7.2PBS中洗两次,搅拌,每次5min,再用蒸馏水洗1min,除去盐结晶。 3.用50%缓冲(
自身抗体的产生和遗传因素关系密切。Bell等的研究发现,全身性 红斑狼疮 患者抗SS-A抗体阳性患者,HLA-B 8 抗原出现率为81%,HLA-DR 3 出现率为100%。显着高于抗Ro与抗nRNP阴性或nRNP阳性的患者。 自身抗体的产生机理是十分复杂的问题,尚待深入探讨,使各种学说综合统一还要进行大量的实验研究,明确自身抗体在发病机理中的作用,对诊断和
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