原位杂交组化（ISHH）与免疫组织化学（IHC）结合法是先后用ISHH和IHC在同一切片或两个相邻切片进行染色，这样就可以同一细胞中显示出某种mRNA和相应的蛋白、多肽或其它抗原，从而可更好地了解某一基因的转录和蛋白、多肽合成的动力学。ISHH与IHC结合法可以在相邻切片上分别进行ISHH和IHC染色，也可先后在同一切片上进行ISHH和IHC染色。前者可使I...
...过 DNA 变性处理，覆以上述滤膜，再于其上方压上多层干燥的吸水纸，借助它对深 盐溶 液的上吸作用，凝胶上的单链DNA将转移到滤膜上。转移是原位的，即DNA片段的位置保持不变。转移结束后，经过80℃烘烤的DNA，将原位地固定于膜上。 图13-6 Southern印迹杂交示意图 当含有特定 基因 片段已原位转移到膜上后，即可与 同位素标记 了的 探针 进行杂交...
...性地表达于肾脏和发育中的泌尿生殖道。 美国德克萨斯大学西南医学中心内科学肾脏科的Bai Y及其同事最近研究发现，Ksp-cadherin基因启动子中近位250bp足以驱动组织特异性基因在体内外表达。该启动子中近位120bp在小鼠和 人类 之间高度保守，均含有DNase I高敏位点，这是肾脏细胞所特有的。 在-55位点上，启动子含有一个肝细胞核因子-1（HNF...
...细胞的干扰。 具体操作步骤如下： ①全血100～150μl，放入5ml试管，并用50～100μl PBS稀释，总体积为200μl。] ②荧光标记的单克隆抗体染色30min，4 ℃ （或放于冰上）。单克隆抗体的浓度因不同来源差异很大，但为了使用方便，可按其说明书配成每次实验使用10μl。注意蔽光。 ③用3～4μl冷BPS清洗。离心250×g（约每分钟1500转...
心肌损伤早期标志物： 指心肌损伤后 6 小时内血中水平升高的标志物。 肌酸激酶 MB 同工酶（ CK-MB ） CK-MB 可以诊断无骨骼肌损伤的 心肌梗死 ，也适用于早期诊断，其临床特异性高于 肌红蛋白 ，在不同时间重复此项检测有助于确诊 AMI ；溶栓治疗 90 分钟后，测值增加 4 倍，提示梗阻的血管再灌注成功。对 不稳定心绞痛 的病人， CK-MB
心肌损伤早期标志物： 指心肌损伤后 6 小时内血中水平升高的标志物。 肌酸激酶 MB 同工酶（ CK-MB ） CK-MB 可以诊断无骨骼肌损伤的 心肌梗死 ，也适用于早期诊断，其临床特异性高于 肌红蛋白 ，在不同时间重复此项检测有助于确诊 AMI ；溶栓治疗 90 分钟后，测值增加 4 倍，提示梗阻的血管再灌注成功。对 不稳定心绞痛 的病人， CK-MB
...。图5.2中10nm的胶体金溶液中蛋白质的最适稳定量为45μg/ml。 图5-2 蛋白最适稳定量示意图 （2）目测法：以目测法确定胶体金与待标记蛋白质用量比例，将标记的蛋白质逐级稀释后（由5μg～45μg另设对照管），各取等体积顺序加入一系列装有1ml胶体金的试管中，5min后，在上述各管内分别加入0.1ml 10%氯化钠，依表5-5顺序进行。 表5-5 具...
原位杂交组化（ISHH）与免疫组织化学（IHC）结合法是先后用ISHH和IHC在同一切片或两个相邻切片进行染色，这样就可以同一细胞中显示出某种mRNA和相应的蛋白、多肽或其它抗原，从而可更好地了解某一基因的转录和蛋白、多肽合成的动力学。ISHH与IHC结合法可以在相邻切片上分别进行ISHH和IHC染色，也可先后在同一切片上进行ISHH和IHC染色。前者可使I...
...次固定液，过夜。 （2）随后，作10～40μm的冰冻切片，放入第一抗体血清作用12～18h，4℃，用含蔗糖的PBS洗数次。 （3）置于HRP标记抗体液（第二抗体）4 ℃ 过夜。然后用4℃含蔗糖PBS反复冲洗数次。4 ℃ 浸漂过夜。 （4）2.5%戊二醛（pH7.4磷酸缓冲液）再固定1h，4 ℃ 用含蔗糖PBS反复冲洗去戊醛，每次5min，共洗3次。 （5）D...
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