...二）cDNA探针 cDNA是指互补于mRNA的DNA分子（complementary DNA）。cDNA是由RNA经一种称为逆转录酶的DNA聚合酶催化产生的。携带逆转录酶的病毒侵入宿主细胞后，病毒RNA在逆转录酶的催化下转化成双链cDNA，并进而整合入宿主细胞染色体DNA分子，随宿主细胞DNA复制同时复制，这种整合的病毒基因组称为原病毒。在静止状态下，可被复...
...26个外显子MspⅠ RFLP为例，具体介绍检测的方法和步骤，笔者对湖北地区健康成人（120例）进行了检测。 （一）材料 引物（如前所述），TaqDNA聚合酶、dNTP、限制性内切酶MspⅠ、高速离心机、基因扩增仪、恒温水浴箱、电泳系统、紫外监测仪。 （二）方法 1.模板DNA的提取 可采用改良的TritonX-100法提取人白细胞DNA，此法结果稳定，但操...
...双螺旋 解旋 并松开，然后每条 多核苷酸 链各以自己为模板（template）吸收周围 游离核 苷酸，按碱基互补原则，进行氢键结合。在一些 聚合酶 作用下，合成新的互补的链，与原来模板 单链 并列盘旋在一起，形成了稳定的双 螺旋结构 （图3-4）。 这样新形成的2个DNA分子与原来 DNA分子的 碱基顺序 完全一样。每个子代DNA分子的一条链来自亲代DNA，...
...）：其一致顺序为TATAATAAT。它约在基因转录起始点上游约-30-50bp处，基本上由A-T碱基对组成，是决定基因转录始的选择，为RNA聚合酶的结合处之一，RNA聚合酶与TATA框牢固结合之后才能开始转录。] （2）CAAT框（CAAT box）：其一致顺序为GGGTCAATCT，是真核生物基因常有的调节区，位于转录起始点上游约-80-100bp处，可能...
...5kD） 10.0 1ng/次 引物1,2（各25bp,20μmol/L） [3,4] 5.0 1.0μmol/L（100pmol） Taq聚合酶储存液 [2] 0.5 2U/100μl 总体积（pH8.3） 100.0 石蜡油 50～100.0 扩增条件：94℃60s,37℃60s,72℃120s,共25～30个循环。 注：[1]反应缓冲液[10×]含：1...
...主 细胞 中的DNA复制体系进行DNA的复制，这是了解真核生物DNA复制的体外模型。在真核生物DNA 复制叉 处，需要两种不同的酶。DNA 聚合酶 α(polα)和DNA聚合酶δ(polδ)。polα和 引物 酶紧密结合，在DNA模板上先合成 RNA 引物，再由polα延长DNA链，这种活性还要复制因子C参与。同时结合在引物模板上的PCNA( 增殖 细胞核 ...
...）：其一致顺序为TATAATAAT。它约在基因转录起始点上游约-30-50bp处，基本上由A-T碱基对组成，是决定基因转录始的选择，为RNA聚合酶的结合处之一，RNA聚合酶与TATA框牢固结合之后才能开始转录。] （2）CAAT框（CAAT box）：其一致顺序为GGGTCAATCT，是真核生物基因常有的调节区，位于转录起始点上游约-80-100bp处，可能...
人 疱疹 病毒——一种可在接受器官移植的儿科患者中引起严重后果的病毒——可通过聚合酶链反应（PCR）进行监测。 接受器官移植的儿童往往会由于疱疹病毒的存在而预后极差甚至死亡。德克萨斯大学的R. H. Scheuermann及其同事研究了PCR法在定量病毒感染以及区分疾病期和潜伏期中的作用。 研究者们对8种疱疹病毒进行了分析： 单纯疱疹 病毒1和2、 带状疱疹...
...重，须排除 类风湿因子 （ RF ）及其他原因引起的 假阳性 。 凡血清HbsAg阳性，或血清 HBV - DNA 阳性，或HBV DNA 聚合酶 阳性，或血清 HBsAb -IgM阳性。或肝内HbcAg和（或）HbsAg阳性；或HBV DNA阳性，如有以上任何一项阳性，即可诊断现症 乙型肝炎病毒 感染。如无任何临床表现， 肝功能 正常，抗HBs持续阳性6个...
...变化，可能有利于调控蛋白结合而促进转录。 4.DNA拓扑结构变化 天然双链DNA的 构象 大多是负性 超螺旋 。当基因活跃转录时， RNA 聚合酶 转录方向前方DNA的构象是正性超螺旋，其后面的DNA为负性超螺旋。正性超螺旋会拆散核小体，有利于RNA聚合酶向前移动转录；而负性超螺旋则有利于核小体的再形成。 5.DNA 碱基 修饰变化 真核DNA中的 胞嘧啶 ...
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