(一)基本原理 应用DNA探针缺口翻译(nick translation)方法,通过碱基配对以一条DNA链为模板,将生物素标记的某一种脱氧三磷酸核苷酸如Bio-dUTP渗入有缺口的DNA链。将生物素标记的DNA探针与细胞或组织进行原位杂交。显示方法有二种:一种是用HRP显示,类似免疫电镜技术中采取的包埋前染色法,利用地高辛-过氧化物酶HRP显色法进行光镜水平...
...量代谢 也遵循这一规律,即在整个能量转化过程中,机体所利用的蕴藏于食物中的化学能与最终转化成的热能和所作的外功,按能量来折算是完全相等的。因此,测定在一定时间内机体所消耗的食物,或者测定机体所产生的热量与所做的外功,都可测算出整个机体的能量代谢率(单位时间内所消耗的能量)。 测定整个机体单位时间内 发散 的总热量,通常有两类方法: 直接测热法 和间接测热法。
...Raw)指呼吸时气体在气道内流动所产生的阻力。其大小与气道内径、气流速度及气体的粘度和密度有关。 气道阻力(Raw)= 肺泡压可由体积描记仪测定 口腔压通常情况下等于大气压为零 流速由流速仪直接测定 正常值:0.098~0.294kPa/L/s Raw增加提示有气道阻塞,见于阻塞性肺疾病。 二、肺顺应性(lungcompliance,CL)是指在单位压力改变...
蛋白质溶液浓度测定方法有多种,下述几种方法可供选用。蛋白质浓度的测定,往往用于计算纯化方法的回收率的重要方法。 一、双缩脲法 双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,至令仍广泛采用。在需要快速,但不很准确的测定中,常用此法。硫铵不干扰显色,这对蛋白质提纯的早期价段是非常有利的。双缩脲法的原理是Cu2+与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成 紫蓝 色络...
...表观遗传调节酶药物的出现,利用表观遗传靶标作为癌症化学治疗与化学预防的有效而有价值的途径正在崭露头角。 两位学者介绍说,表观遗传是用于描述与DNA顺序变化无关的基因表达的核分裂和减数分裂的遗传状态。表观遗传事件在生物学的所有方面都是重要的,在过去10年中的研究已经表明在癌症的发生与进展中具有至关重要的作用。在目前的学术界研究最多的两个表观遗传现象是DNA甲基...
弥散量(DL)是测定肺泡膜功能的一项生理指标,即在一定时间内(1min)单位分压差(kPa)条件下,能够通过肺泡膜的气体量。以公式表示如下, 弥散量 = 通过肺泡膜气体量 肺泡中气体分压-肺毛细血管血液中气体分压 临床上多以一氧化碳作为测定肺泡膜弥散量的气体。因CO在血中溶解度大于肺泡的溶解度,而且CO与血红蛋白结合比氧大210倍,吸入少量CO通过肺泡膜后,...
(一)标准氢电极 电极电位的绝对值是无法测定的,但可以选定一个电极作为标准,将各种待测电极与它相比较,就可得到各种电极的电极电位相对值。国际纯粹和应用化学协会(IUPAC)选定“标准氢电极”作为比较标准。 标准氢电极是氢离子浓度为1mol·L-1氢气的压力为101.325kPa的电极。国际上规定,298K 时,标准氢电极的电极电位为零。用符号 H +/ H2...
...,另一端有芳基叠氮化合物。此法适用于含氨基检测基团。其敏感性和光敏生物素标记探针相同,检测时需要抗DNP抗体和免疫化学显色。标记方法:(1)DNA不心变性,必须溶于水中,取2~10μg10μl,加入二甲亚砜25μl,每微克DNA加入光敏DNp 2μg(在避光条件下),混匀。(2)置入冰浴中,在特制灯10cm下照射10min。(3)加入水165μl,4mol/...
(一)特异性高:首次报导的PCR所用的 DNA 聚合酶 是 大肠杆菌 的DNAPolymeraseI的Klenow大片段,其 酶活性 在90℃会变性 失活 ,需每次PCR循环都要重新加入Klenow大片段,同时 引物 是在37℃延伸(聚合)易产生模板—引物之间的 碱基 错配、致特异性较差,1988年Saiki等从 温泉 水中分离到的水生嗜热 杆菌 中提取的热...
除了生理条件可引起酶测定值的变化外,还有其它一些非病理因素也会引起实验室测定结果的变化。 (一)酶测定方法 酶测定方法大致经过三个历史发展阶段,50年代以前大都使用“固定时间法”,即让酶与底物作用一段固定时间,一般为半小时左右,然后停止酶反应,用光电比色测产物生成量或底物消耗量,从而计算出酶催化反应的平均速度。再据此按各作者自己定义的“单位”向临床报告测定结...
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