...水浴30min以上。(4)15000rpm离心15min。(5)吸取上清点样电泳,观察。(四)转化子DNA的酶切鉴定1.转化子DNA的快速少量抽提(1)同本节 二.(三).1.(2)菌液移至5mlEppendorf 管中,9000rpm,离心...
...替代、微小的缺失或手稿的检测。用SSCP法检查基因突变时,通常在疑有突变的DNA片段附近设计一对引物进行PCR扩增,然后将扩增物用甲酰胺等变性,并在聚丙烯酰胺凝胶中电泳,突变所引起的DNA构象差异将表现为电泳带位置的差异,从而可据之作出诊断。...
...)百分比不超过10%(图9.3)。图9.3一例5周龄患儿pH监测结果,其早产7周,有呼吸暂停、心动过缓及发育迟缓情况。24小时pH监测显示平卧位时酸反流明显增加。反流总时间百分比为52%(根据ESPGAN记分法,正常值为13%)、箭头示平卧...
...证实DMD病人中有65%以上有缺失突变,5%有复制性突变,30%没有基因缺失,后者可利用PCR方法扩增DMD基因内部多态性位点及DMD基因3’端小卫星的DNA(-CACA-)后,再用RFLP分析可检测出携带者以及进行产前诊断。Gusella等...
...本身快速、方便、无放射线损伤,易被实验室接受。可检出3个CFU的HSV1,灵敏度高,能检测出中枢神经系统感染第1dCSF中HSv DNA阳性结果,并可用于药物治疗效果的评价。由于病毒的变异性,会出现酶切点突变丢失现象,从而造成酶切阴性结果。...
...为3.3kb,用Eoor I和SalI双酶切后会出现600bp和-2.7kb两个DNA片段,提取转化细菌的质粒DNA作酶切后做电泳观察其酶切图谱,就能分析得结果;如插入的目的序列中有其它限制性内切酶位点,也能在酶切电泳图谱上观察到。这就可以...
...不同策略。(一)外源DNA带有非互补突出端的片段用两种不同的限制酶分别消化质粒等载体和外源DNA,可以产生带非互补突出端的片段,这是最容易连接的片段,如图24-1所示。将已经连接外源DNA的细菌质粒载体转化感受态的大肠杆菌,然后在含有AP等...
...菌落形态亦相似,但对于糖的发酵结果不同,因此可利用不同种糖作为培养基质进行生化反应予以区别。(四)抗原检测与分析有些细菌即使用生化反应变难区别,但其细菌抗原成份(包括菌体抗原、鞭毛抗原)却不同。利用已知的特异抗体测定有无相应的细菌抗原可以确定...
...10%CO2(烛缸)环境中培养,24-48小时观察结果。培养后还需进行菌落形态,革兰氏染色,氧化酶试验和糖发酵试验等鉴定。培养阳性率男性80%-95%,女性80-90%。(三)抗原检测1.固相酶免疫试验(EIA):可用来检测临床标本中的...
...新加坡科学家日前成功地找到了导致华人的一对染色体。 新加坡国防医学研究院生物医药学实验室主任叶平发博士称,该实验室已从人类的23对染色体中,确认出一对染色体的某一段基因组织与华人的近视有关。 叶平发博士还表示,为了进一步确定造成近视的原因...
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