...到ApoE2/2表型的Ⅲ型 高脂蛋白血症 病人未在成年即患 冠心病 ,从此,对ApoE多态性进行了广泛研究,许多证据认为,ApoE多态性是 动脉粥样硬化 早期及发展过程中个体差异的主要原因。大量人群调查发现ε4等位基因的一般作用是可以显着地升高健康人的总胆固醇浓度,使之易患 动脉粥样硬化 ,相反,ε2等位基因的一般作用是降低胆固醇浓度,其降低效应是ε4升高胆...
...NA克隆的方法亦多种多样,特别是PCR技术的应用,以及RFLP、SSCP等技术的开展,使得DNA克隆技术的应用日益广泛。 DNA克隆技术在 动脉粥样硬化 等疾病的病因及诊疗研究中也有重要的作用。例如在研究脂蛋白酯酶基因发生的特异突变时,可以设计合成扩增引物,进行模板DNA的PCR扩增,所得的PCR产物较小,仅有300多bp,且纯度不足以进测序。为了对此突变序...
...理功能有:①是LDL受体的配体,也是肝细胞CM残粒受体的配体,它与脂蛋白代谢有密切相关性;②ApoE具有多态性,多态性是决定个体血脂水平与 动脉粥样硬化 发生发展密切相关;③参与激活水解脂肪的酶类,参与免疫调节及神经组织的再生。 人类 ApoE主要在肝脏和脑组织合成,在其他组织包括单核细胞(含巨噬细胞)也有合成能力。人的肾上腺、卵巢颗粒细胞也能合成ApoE。...
Felgines等在研究RICO鼠的肝载脂蛋白时报道了抗体法的应用。 用来源于 牛肾 皮质的LDL-R免疫兔,得到兔抗牛-LDL-R抗体,离心法收集纯化细胞膜蛋白,点样于硝化纤维膜上,于猝灭液中温育1h,以TTBS洗3次,加入稀释的抗LDL-R抗体血清,再温育90min,TTBS洗后,纤维膜用结合有 辣根 过氧化物酶的第二抗体羊抗兔-IgG温育1h30min...
蛋白多糖具有可溶于4mol/L盐酸胍的性质,再经DEAE-纤维素层析除去其他杂质,非蛋白多糖与蛋白多糖用不同浓度尿素可分段层析分开。 1.取动脉血管小心除去血管周围脂肪组织和纤维膜,用冷0.5mol/l PBS pH7.8洗涤,2kr/min离心10min。 2.用匀浆器破碎,加入15倍体积的提取液(0.05mol/L乙酸pH5.8、4.0mol/L盐酸胍、...
...连蛋白的基本原理是用NaCl脱氧胆酸钠液提取血管壁中的粘连蛋白,再用高盐除去杂质,然后进一步用Sephacryl层析纯化,方法如下: 1.将动脉血管壁组织加10倍体积处理液(0.05mol/lTris-HCL pH7.6、0.5%核酸酶),4℃搅拌20min,10kr/min离心10min。 2.沉淀用含0.05mol/L Tris-HCl pH7.6、0....
一、原理 将抗载脂蛋白血清均匀地混合于琼脂糖凝胶内,打孔,加样。孔中待测样品的抗原辐射状向含抗体的胶内扩散,至抗原与抗体的量达一定比例时形成可见的沉淀环。一定条件下沉淀环的直径或面积与相应的抗原Apo含量成正比。 二、试剂 1.0.05mol/L pH8.2巴比妥钠-HCl缓冲液;巴比妥钠15.8g加水至1000ml。以1.17mol/l HCl调pH至8....
...nstein和Ross先用5mol/L盐酸胍抽提,再用胶原酶水解其他非弹性蛋白组分,最后还原二硫键,分离提取弹性蛋白。具体方法如下: 1.将动脉血管壁洗净,小心除去附着结缔组织。 2.将血管壁组织浸于4℃ 50%的吡啶液,破碎组织,3kr/min离心15min。 3.取沉淀用蒸馏水洗涤3次,真空干燥后研成粉末。 4.将粉末悬浮于2mol/L NaCl,4℃搅...
...凝胶端1cm左右,停止电泳,取出凝胶板,在凝胶板三孔之间开两条宽0.2cm,长5~5.5cm长的凝胶槽。1与2孔之间的凝胶槽(A槽)中加入羊抗人全血清抗体,2与3孔之间的凝胶槽(B槽)加入羊抗人某Apo单价特异抗血清,将凝胶板置于含少量水的大平皿中,加盖,水平置于37℃培养箱24h,再观察弧形白色沉淀线,与A槽沉淀线位置比较若位置完全相同,初步可以确认为2孔...
...Ⅰ基因,发现家族性早发冠心病患者都出现6.5kb片段纯合子,正常人为13kb纯合子,其杂合子为13kb/6.5kb,推测纯合子6.5kb与 动脉粥样硬化 发病有关。 ApoAⅠ与ApoCⅢ缺陷者表现为血HDL水平降低,易出现早期动脉粥样 硬化 。有报道ApoAⅠ减少,会导致LCAT活性降低,使ApoAⅠ、ApoAⅢ的脂蛋白如CM置换发生障碍,从而在体内蓄积。...
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