...(一)质粒DNA的提取及鉴定1.(1)将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到通气良好的15ml的试管中,接入一单菌落,于37℃剧烈振荡培养过夜。(2)将1.5ml培养物倒入1.5ml离心管中,用台式离心机于4℃以12000g离心5...
...必须建立完善基因诊断的技术,这是医学检验工作者面临的新课题。目前基因诊断技术可利用核酸探针进行分子杂交或进行核酸测定来分析基因突变和突变的位置。由于mRNA分子直接转录了DNA分子上基因的信息,又直接指导蛋白质合成,在细胞内又有一定的量,故...
...诊断衣原体感染单靠临床表现是不够的,必需经过一定的实验室检查,才能够确诊。常用的检查方法是衣原体培养、直接荧光抗体检测、酶标免疫反应和DNA探针与聚合酶链式反应(PCR)。 (1)衣原体培养 由于沙眼衣原体是在细胞内寄生,所以它只能在组织...
...诊断衣原体感染单靠临床表现是不够的,必需经过一定的实验室检查,才能够确诊。常用的检查方法是衣原体培养、直接荧光抗体检测、酶标免疫反应和DNA探针与聚合酶链式反应(PCR)。 (1)衣原体培养 由于沙眼衣原体是在细胞内寄生,所以它只能在组织...
...缺失并伴发3种其它X连锁隐性遗传病,再运用RFLP连锁分析将DMD基因定位于Xp21。Ray等利用了X与21号染色体基因易位,于1986年克隆了该基因的一部分,即XJ系列探针。Kunkel等于同年利用男患儿(B.B)的DNA,通过灵敏的技术...
...缺失并伴发3种其它X连锁隐性遗传病,再运用RFLP连锁分析将DMD基因定位于Xp21。Ray等利用了X与21号染色体基因易位,于1986年克隆了该基因的一部分,即XJ系列探针。Kunkel等于同年利用男患儿(B.B)的DNA,通过灵敏的技术...
...研究,我们对不同种类的弯曲菌,在20%小牛血清布氏肉汤和全羊血中保存,于不同时间检查了存活情况、生物学特性及染色体DNA的酶切图谱,实验证明,用这种方法保存,在存活率、菌体形态、生物特性保持较好,染色体DNA酶切带型前后保持一致。1 材料和...
...镰状红细胞贫血症的基因诊断可采用PCR-限制性内切酶谱分析法,先用PCR从患者基因组DNA扩增含突变位点的珠蛋白基因片段,再选择适当的限制性内切酶水解PCR产物,根据酶切产物在电泳图谱上的片段数量和大小做出判断.也可与特意的寡核苷酸探针...
...小时内完成。作用把含某种多肽或蛋白的cDNA片段的质粒,按照第十九章 在光照下标记光敏生物素,然后经DNA酶消化1h,得到大量100~500bp长度的混合片段,变性后用于原位杂交。如为培养细胞或细胞涂片,用95%乙醇、5%乙醇固定5min,...
...(1)特异正常基因的分离与克隆:应用重组DNA和分子克隆技术结合基因定位研究成果,已有不少基因并将会有更多人类基因被分离和克隆,这是基因治疗的前提,在当代分子生物技术条件下,一般来说,只要有基因探针和准确的基因定位,任何基因都可被克隆。...
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