（1）透析除盐：蛋白质溶液内应除去多余的电解质，不然过高的盐类物质会降低胶体金颗粒的Zeta电位，影响蛋白质的吸附，因此，标记之前必须彻底除盐。一般将蛋白质置入透析袋中然后直接放入双蒸水或极低浓度的盐水（0.005mol/l NaCl , pH7.0）透析。 （2）去除蛋白质中的沉淀：长期低温保存的蛋白质或4 ℃ 较长时间保存的抗体，特别是在浓度高于2mg/...
...des），氨基 葡聚糖 （glycosaminoglycans）或另外一些特殊的因子Ⅻ激活物也可自损伤的 内皮细胞 释放，因此内源性凝血系统启动。在家兔内毒素引起的DIC中常可有内皮细胞脱落，在循环血中有内皮细胞出现。抗原抗体复合物 粘附 在 肾小球 等 微血管 壁上时，可引起血管内皮细胞损伤。 血管炎 时也可继发血管内皮细胞损伤，进一步触发DIC。 此外，...
正确认识癌前疾病癌前病变、 非典 型性增生及原位癌是防止肿瘤发生发展及早期诊断肿瘤的重要环节。 1．癌前疾病及癌前病变 癌前疾病及癌前病变是指某些统计上具有明显癌变危险的疾病及病变，如不及时治愈即有可能转变为癌。因此，早期发现与及时治愈癌前疾病或癌前病变，对肿瘤的预防具有重要的实际意义。常见的癌前疾病及病变有以下几种： （1）粘膜白斑：常发生在食管、口腔、子...
胶体金标记蛋白质的原理，一般认为是由于pH值等于或稍偏碱于蛋白质等电点时，蛋白质呈电中性，此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小，但蛋白质分子的表面张力却最大，处于一种微弱的水化状态，较易吸附于金颗粒的表面，由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒的表面，形成一个蛋白层，阻止了胶体金颗粒的相互接触，而使胶体金处于稳定状态，如果＝低于蛋白质的等电点时，蛋白质带...
取1g RB200及PCL52g放在乳钵中研磨5min（在通风橱中）。然后加入10ml无水丙酮，放置5min，不断搅拌。过滤，用滤液进行标记抗体。剩余部分吸附在滤纸上，4℃干燥保存。 取抗体（20mg/ml）每毫升加入生理盐水和0.5mol/l pH9.0的碳酸盐缓冲液各1ml稀释。逐滴加入0.1ml RB200溶液，边加入边搅拌，在0～4℃中结合12～18...
如前所述，若我们把角蛋白视为上皮性肿瘤的共性免疫标记物，则对不同器官的上皮性肿瘤具有特别或优先识别作用的标记物，可看作为器官特异性或相对特异性标记物。经过长期实践的检验，一些上皮器官特异性标记物已为人们所接受。此外，也发出了一些效果较肯定、特异性较好、诊断作用较明确的新的标记物。现将其生物化学本质、肿瘤表达情况及诊断应用附表如下（表12-5），并将其在上皮组...
原位杂交免疫细胞化学技术的应用除在培养的离散细胞涂片和各种组织制片如恒冷箱冷冻切片、石蜡包埋切片外，又进一步扩展到染色体铺片和电镜水平。现分别予以介绍。
1．单面法 以不同直径的金粒分别标记两种不同的抗体，以间接法先染第一种抗体，洗净后再染第二抗体。 2．双面法 以不同直径的金粒标记的抗体于镍网的两面分另进行免疫染色。本法的优点是可防止两种金标记的抗体的相互干扰，又可防止第一次应用的一抗与其相应的抗原相结合，占据了空间，第二次应用的抗体没有适合的空间使之与相应的抗原相结合。 3．异种动物抗原—抗体染色法 如一...
...性地表达于肾脏和发育中的泌尿生殖道。 美国德克萨斯大学西南医学中心内科学肾脏科的Bai Y及其同事最近研究发现，Ksp-cadherin基因启动子中近位250bp足以驱动组织特异性基因在体内外表达。该启动子中近位120bp在小鼠和人类之间高度保守，均含有DNase I高敏位点，这是肾脏细胞所特有的。 在-55位点上，启动子含有一个肝细胞核因子-1（HNF-1...
（一）组织切片的原位杂交细胞化学方法 （1）组织准备：大鼠以10%水合氯醛（0.3ml/100g 体重），或1%戊巴比妥钠约1ml（3～4mg/100g体重）腹腔内注射麻醉，用100ml生理盐水冲洗和150ml 4%多聚甲醛主动脉灌注固定。固定半小时后，取出组织块，置入4%多聚甲醛液中后固定4～6h，4℃。 如要取脑组织，可于灌注后置4℃冰箱内过夜，次晨取脑...
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