原位杂交技术 (In situ hybridization，ISH)是 分子 生物学 、 组织化学 及 细胞学 相结合而产生的一门新兴技术，始于20世纪60年代。1969年国耶鲁大学的Gall等(1969)首先用爪蟾 核糖体 基因探针 与其 卵母细胞 杂交，将该 基因 进行定位，与此同时Buongiorno—Nardelli和Amaldi等(1970)相继利...
DNA是遗传信息的载体，遗传信息的作用通常由蛋白质的功能来实现，但DNA并非蛋白质合成的直接模板，合成蛋白质的模板是RNA。正常细胞遗传信息的流向是： 与DNA相比，RNA种类繁多，分子量相对较小，一般以单股链存在，但可以有局部二级结构，其碱基组成特点是含有尿嘧啶(uridin,U)而不含胸腺嘧啶，碱基配对发生于C和G与U和A之间，RNA碱基组成之间无一定的...
目的序列与载体DNA正确连接的效率、重组导入细胞的效率都不是百分之百的，因而最后生长繁殖出来的细胞并不同都带有目的序列。一般一个载体只携带某一段外源DNA，一个细胞只接受一个重组DNA分子。最后培养出来的细胞群中只有一部分、甚至只有很小一部分是含有目的序列的重组体（recombinant）。将目的重组体筛选出来就等于获得了目的序列的克隆，所以筛选(dcree...
DNA修复 （DNA repairing）是 细胞 对 DNA 受损伤后的一种反应，这种反应可能使DNA结构恢复原样，重新能执行它原来的功能；但有时并非能完全消除DNA的损伤，只是使细胞能够耐受这DNA的损伤而能继续生存。也许这未能完全修复而存留下来的损伤会在适合的条件下显示出来（如细胞的 癌 变等），但如果细胞不具备这修复功能，就无法对付经常在发生的DNA...
...。 (一)顺式作用组件(cisacting elements) 真核 基因 的顺式调控组件是基因周围能与特异 转录因子 结合而影响转录的 DNA 序列。其中主要是起正性调控作用的顺式作用组件，包括 启动子 (promoter)、 增强子 (enhancer)；近年又发现起负性调控作用的组件枣沉寂子(silencer)。 1.启动子 与 原核 启动子的含义相...
核酸的序列分析，即核酸一级结构的测定，是现代分子生物学中一项重要技术。目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等（1977年）提出的双脱氧链终止法及Maxam和Gilbert（1977年）提出的化学降解法，其中双脱氧链终止法是目前应用最多，最好的技术。 一、Sanger双脱氧链终止法原理 通常DNA的复制需要：DNA聚合酶，单链DNA模板，带有3'-OH...
生物变性 在致病因素的作用下，组织和细胞发生物质 代谢障碍 ，在细胞内和间质中出现各种异常物质或原有的某些物质堆积过多的现象。细胞受到致病因子的作用后，细胞的功能和结构可在适应能力范围内改变。如果致病因子作用过强，上述改变超过该细胞的适应能力则出现变性。致病因子除去后，该细胞可能恢复正常，但严重的变性可能发展为 坏死 。变性一般分为 ： 蛋白质 代谢障碍、 ...
生物变性 在致病因素的作用下，组织和细胞发生物质 代谢障碍 ，在细胞内和间质中出现各种异常物质或原有的某些物质堆积过多的现象。细胞受到致病因子的作用后，细胞的功能和结构可在适应能力范围内改变。如果致病因子作用过强，上述改变超过该细胞的适应能力则出现变性。致病因子除去后，该细胞可能恢复正常，但严重的变性可能发展为 坏死 。变性一般分为 ： 蛋白质 代谢障碍、 ...
...， 催化 脂肪酸活化的酶是 脂酰 CoA 合成酶 (acyl CoA synthetase)。 活化后生成的脂酰CoA极性增强，易溶于水； 分子 中有 高能键 、性质活泼；是酶的特异 底物 ，与酶的亲和力大，因此更容易参加反应。 脂酰CoA合成酶又称 硫激酶 ，分布在 胞浆 中、 线粒体 膜和 内质网 膜上。胞浆中的硫激酶催化 中短链脂肪酸活化；内质网膜上的...
将目的基因或序列插入载体，主要靠DNA连接酶和双链DNA粘末端单链序列互补结合的配合使用。有以下主要的方式。
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