...NA克隆的方法亦多种多样，特别是PCR技术的应用，以及RFLP、SSCP等技术的开展，使得DNA克隆技术的应用日益广泛。 DNA克隆技术在 动脉粥样硬化 等疾病的病因及诊疗研究中也有重要的作用。例如在研究脂蛋白酯酶基因发生的特异突变时，可以设计合成扩增引物，进行模板DNA的PCR扩增，所得的PCR产物较小，仅有300多bp，且纯度不足以进测序。为了对此突变序...
...理功能有：①是LDL受体的配体，也是肝细胞CM残粒受体的配体，它与脂蛋白代谢有密切相关性；②ApoE具有多态性，多态性是决定个体血脂水平与 动脉粥样硬化 发生发展密切相关；③参与激活水解脂肪的酶类，参与免疫调节及神经组织的再生。 人类 ApoE主要在肝脏和脑组织合成，在其他组织包括单核细胞（含巨噬细胞）也有合成能力。人的肾上腺、卵巢颗粒细胞也能合成ApoE。...
蛋白多糖具有可溶于4mol/L盐酸胍的性质，再经DEAE-纤维素层析除去其他杂质，非蛋白多糖与蛋白多糖用不同浓度尿素可分段层析分开。 1．取动脉血管小心除去血管周围脂肪组织和纤维膜，用冷0.5mol/l PBS pH7.8洗涤，2kr/min离心10min。 2．用匀浆器破碎，加入15倍体积的提取液（0.05mol/L乙酸pH5.8、4.0mol/L盐酸胍、...
...连蛋白的基本原理是用NaCl脱氧胆酸钠液提取血管壁中的粘连蛋白，再用高盐除去杂质，然后进一步用Sephacryl层析纯化，方法如下： 1．将动脉血管壁组织加10倍体积处理液（0.05mol/lTris-HCL pH7.6、0.5%核酸酶），4℃搅拌20min，10kr/min离心10min。 2．沉淀用含0.05mol/L Tris-HCl pH7.6、0....
...nstein和Ross先用5mol/L盐酸胍抽提，再用胶原酶水解其他非弹性蛋白组分，最后还原二硫键，分离提取弹性蛋白。具体方法如下： 1．将动脉血管壁洗净，小心除去附着结缔组织。 2．将血管壁组织浸于4℃ 50%的吡啶液，破碎组织，3kr/min离心15min。 3．取沉淀用蒸馏水洗涤3次，真空干燥后研成粉末。 4．将粉末悬浮于2mol/L NaCl,4℃搅...
...Ⅰ基因，发现家族性早发冠心病患者都出现6.5kb片段纯合子，正常人为13kb纯合子，其杂合子为13kb/6.5kb，推测纯合子6.5kb与 动脉粥样硬化 发病有关。 ApoAⅠ与ApoCⅢ缺陷者表现为血HDL水平降低，易出现早期动脉粥样 硬化 。有报道ApoAⅠ减少，会导致LCAT活性降低，使ApoAⅠ、ApoAⅢ的脂蛋白如CM置换发生障碍，从而在体内蓄积。...
...胞氧化成氧化LDL，可通过清道夫受体被巨噬细胞摄取，形成泡沫细胞，氧化LDL还能吸引血单核细胞粘附于血管壁，对内皮细胞有毒性作用等，从而促进粥样斑块形成。这些研究无疑阐明了巨噬细胞的清道夫受体在粥样斑块形成机制中起有重要的作用，另一方面，也推测巨噬细胞通过清道夫受体清除细胞外液中的修饰LDL，尤其是氧化的LDL，是机体的一种防御功能。可清除血管壁过多脂质；清...
...在机体生长、发育、代谢发挥着不可取代的作用。由脂肪酸转化的前列腺素，而前列腺素近年来倍受重视，它对心血管系统的作用表现为增加心肌收缩性，降低动脉血压，同时伴随着血管扩张和增加血管通透性，前列腺素对大脑皮层有镇定和安定效应。前列腺素还能使 支气管哮喘 缓解而被用于治疗 哮喘 。另外，鞘磷脂、糖鞘酯是神经组织特有的物质，其作用不可忽视。还有一些维生素，如类萜维生...
...完全佐剂或完全佐剂），1周后再免疫1次。待最后一次免疫后的7～10天，取静脉血 测试 抗体效价（试血），效价达到要求后即可一次性放血，采用颈动脉放血，得抗血清。笔者采用此法先后免疫成功ApoAⅠ、AⅡ、B 100 和E的抗血清。 （3）抗血清的保存 免疫成功的动物放血过程，所有用具均严格消毒，并按无菌操作方式进行放血。抗血清的防腐剂以0.05%叠氮钠为宜；也...
...制备（从略）。 2．抗体的标记：基本原理是将抗体与标记物以共价键结合。 3．组织取材。 因为抗原组织容易降解和扩散，取材要及时和低温操作，取动脉壁冰冻切成4～8μm，贴于玻片上立即干燥，用95%乙醇固定15min，然后用0.5mol/l pH7.4 BPS洗1次。 4．抗体染色 抗体染色是利用抗原与抗体特异性结合的原理，37℃30～60min，间接法结合第二...
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