...甚至低于天然LDL,而当修饰程度高时,被巨噬细胞和内皮细胞结合和降解的量随之升高,而且明显高于正常LDL(图9-8、图9-9、图9-10、图9-11)。 另有报道,正常细胞摄取OxLDL时,LDL受体与清道夫受体起协同作用。因为氧化程度不同。OxLDL的ApoB上可能残留多少不等的LDL受体识别位点。用单抗封闭这些位点时,细胞对OxLDL结合量和降解量下降。
Ⅰ型 高脂血症 为常染色体隐性遗传病,具有家族性。主要临床症状为 阵发性腹痛 ,疹状皮肤 黄色瘤 和 肝脾肿大 ,生化特征为含高甘油三酯的乳糜微粒在因浆中大量堆积,脂肪耐量显着异常,LPL活性下降,这种患者体内的LPL含量可能完全缺陷,用目前的检测方法测不出LPL存在,也不可能在肝素注射后使血浆LPL活性下降,推测可能是一种异常LPL翻译后修饰所致。 引起Ⅰ...
...连蛋白的基本原理是用NaCl脱氧胆酸钠液提取血管壁中的粘连蛋白,再用高盐除去杂质,然后进一步用Sephacryl层析纯化,方法如下: 1.将动脉血管壁组织加10倍体积处理液(0.05mol/lTris-HCL pH7.6、0.5%核酸酶),4℃搅拌20min,10kr/min离心10min。 2.沉淀用含0.05mol/L Tris-HCl pH7.6、0....
...转基因动物相比,这一背景下产生的胚胎不但数量多,而且健康。尽管如此,随机交配下的碱基分离可能影响转基因动物的表型,降低了一个已知转基因动物的作用。在混合遗传背景下,碱基分离也直接影响基因动物的表达。已发现一种能够直接抑制了转基因的表达的种系特异性修饰因子(SSM-1)。在C57BL/6J鼠系中,SSM-1碱基分离直接抑制了转基因的表达。相反,在DBA/2JS...
...nstein和Ross先用5mol/L盐酸胍抽提,再用胶原酶水解其他非弹性蛋白组分,最后还原二硫键,分离提取弹性蛋白。具体方法如下: 1.将动脉血管壁洗净,小心除去附着结缔组织。 2.将血管壁组织浸于4℃ 50%的吡啶液,破碎组织,3kr/min离心15min。 3.取沉淀用蒸馏水洗涤3次,真空干燥后研成粉末。 4.将粉末悬浮于2mol/L NaCl,4℃搅...
...DL-R)、低密度脂蛋白受体(LDL-R)、高密度脂蛋白受体(HDL-R)和清道夫受体(scavenger receptor)等。脂蛋白受体的检测与一般受体检测方法的原理及操作基本类同。目前研究最多,应用最广的要属LDL-R,其他脂蛋白受体如清道夫受体、VLDL-R等的检测方法与LDL-R基本相似,多采用125Ⅰ标记的配体检测或是3HTdR掺入法等。本章以L...
... 样排列,如前所述;②电子显微镜下可发现Weibel-Palade小体;③存在第Ⅷ因子关连抗原(VWF),用免疫法测定为阳性反应。此外,在 硬化 血管取材时,巨噬细胞转化的泡沫细胞可能混入,除形态学的差异外,泡沫细胞含有丰富的氧化修饰的LDL,氧化LDL与相应抗体反应后在荧光显微镜下极易区别。 二、平滑肌细胞的鉴定 如前所述,平滑肌细胞除形态、排列有其自身特...
蛋白质溶液浓度测定方法有多种,下述几种方法可供选用。蛋白质浓度的测定,往往用于计算纯化方法的回收率的重要方法。 一、双缩脲法 双缩脲法是第一个用比色法测定蛋白质浓度的方法,至令仍广泛采用。在需要快速,但不很准确的测定中,常用此法。硫铵不干扰显色,这对蛋白质提纯的早期价段是非常有利的。双缩脲法的原理是Cu 2+ 与蛋白质的肽键,以及酪氨酸残基络合,形成 紫蓝 ...
核酸的序列分析,即核酸一级结构的测定,是现代分子生物学中一项重要技术。目前应用的两种快速序列测定技术是Sanger等(1977年)提出的双脱氧链终止法及Maxam和Gilbert(1977年)提出的化学降解法,其中双脱氧链终止法是目前应用最多,最好的技术。 一、Sanger双脱氧链终止法原理 通常DNA的复制需要:DNA聚合酶,单链DNA模板,带有3'-OH...
脂蛋白的物理学特性与它们的脂质组成和含量密切相关,脂蛋白包含各种脂质分子,脂蛋白内的中性脂质含量增高则脂蛋白颗粒的密度下降。而脂蛋白的化学和生物学特性与其所含的载脂蛋白密切相关,因此我们用表2-2列出几种主要的脂蛋白的化学组成。 表2-2 人血 浆脂蛋白的化学组成 总脂蛋白的重量百分比 CM VLDL LDL HDL 2 HDL 3 蛋白质 2.0 10 2...
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