...一、兼并引物（DegeneratePrimer）PCR密码子具有兼并性，如表22-4，单以氨基酸顺序推测编码的DNA序列是不精确的，但可以设计成对兼并引物，扩增所有编码已知顺序的核酸序列。用兼并引物时寡核苷酸中核苷酸序列可以改变，但核苷酸...
...以mRNA为模板，经反转录酶催化合成DNA，则此DNA序列与mRNA互补，称为互补DNA或cDNA。提取出组织细胞的全部mRNA，在体外反转录成cDNA，与适当的载体常用噬菌体或质粒载体连接后转化受体菌，则每个细菌含有一段cDNA，并能...
...不对称PCR的基本原理是采用不等量的一对引物产生大量的单链DNA（ss-DNA）。这两种引物分别称为限制性引物与非限制性引物；其最佳比例一般为1：50～1：100，关键是限制引物的绝对量。限制性引物太多太少，均不利于制备ss-DNA。也...
...一、样品处理DNA是染色体的主要组成部分，是PCR的扩增模板。要进行PCR，研究DNA结构与功能或者用于诊断目的，首先必须从生物体内提取DNA。DNA往往以核蛋白形式存在，其分子量大（人的染色体DNA平均大小为3.0×109bp），提取...
...生物素标记的核苷酸是最广泛使用的一种，如生物素-11-dUTP，可用缺口平移或末端加尾标记法。实验发现生物素可共价连接在嘧啶环的5位上，合成TTP或UTP的类似物。在离体条件下，这种生物素化dUTP可作为大肠杆菌多聚酶I（DNA酶I）的...
...日前，第四军医大学西京医院中医科、心血管外科共同完成的一项陕西省中医管理局科研课题证明，益胃冲剂（白芍等）能有效地逆转胃黏膜癌前病变，其逆转机制可能与其降低病变细胞脱氧核糖核酸（DNA）相对含量、抑制其异常活跃的增生状态有关。 为了从实验...
...互补顺序（即某种程度的同源性）就可以形成杂交双链。分子杂交可在DNA与DNA、RNA与RNA或RNA与DNA的二条单链之间进行。由于DNA一般都以双链形式存在，因此在进行分子杂交时，应先将双链DNA分子解聚成为单链，这一过程称为变性，一般...
...Scl-70的本质是DNA拓朴异构酶-1，其天然分子量为100kD，70kD抗原为其降解片段。DNA拓朴异构酶-1，位于核质中，在核仁中的浓度很高。它与DNA超螺旋的松解过程有关，在DNA双链的复制和转录中起作用。此酶将DNA链切断，并附着在...
...Shero等证实，Scl-70的本质是DNA拓朴异构酶-1，其天然分子量为100kD，70kD抗原为其降解片段。DNA拓朴异构酶-1，位于核质中，在核仁中的浓度很高。它与DNA超螺旋的松解过程有关，在DNA双链的复制和转录中起作用。此酶将...
...在适当的浓度的DNase I作用下在一双链DNA上制造一些缺口，再利用大肠杆菌DNA聚合酶I 的5’—3’外切酶活性依次切除缺口下游的核酸序列，同时将四种脱氧三磷酸核苷（其中一种用放射性标记）利用该酶5’—3’聚合活性补人缺口，使缺口逐个...
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