...感染诊断。三、DNA探针已广泛应用于检测CMV,其中以32P标记的探针敏感性最高,对某些标本来说,杂交方法可能比病毒分离更敏感。四、聚合酶链式反应(PCR)(一)标本的采集及处理采集的标本包括患者的血液、尿,以及腺体组织等。由全血制备的血沉...
...CCTCCTTGTCGAGGCCCCGAAAC3′),可以分别扩增出HSV-1 469bp DNA片段(1981~2359)、HSV-2 391bp片段(1561~1953):从二型PCR扩增产物中设计了一个不分型的特异性探针HSVP3 5 ...
...ELISA方法简便快速敏感特异性高是公认较好的一种诊断方法 (四)分子生物学诊断方法 1.DNA探针(DNAProbe)DNA探针是用DNA制备的诊断试剂用于检测或鉴定特定的细菌方法是用一段已标记的特定的DNA片段(探针)与标本中已变性的...
...压迫针孔片刻,再用纱布敷盖保护创口。(2)三角针埋线法:在距离穴位两侧1-2cm处,用龙胆紫作进出针点的标记。皮肤消毒后,在标记处用0.5-1%的盐酸普鲁卡因作皮内麻醉,用持针器夹住带羊肠线的皮肤缝合针,从一侧局麻点刺入,穿过穴位下方的...
...压迫针孔片刻,再用纱布敷盖保护创口。(2)三角针埋线法:在距离穴位两侧1-2cm处,用龙胆紫作进出针点的标记。皮肤消毒后,在标记处用0.5-1%的盐酸普鲁卡因作皮内麻醉,用持针器夹住带羊肠线的皮肤缝合针,从一侧局麻点刺入,穿过穴位下方的...
...末端氨基上。2.方法125I—Bolton—Hunter试剂可用氯胺T法自行制备,出已有该试剂的苯溶液作为商品出售。使用时取一定量的标记酯(μmol 蛋白用3~5μmol标记酯),用氮气吹除苯,投入欲标记蛋白5~10μg及缓冲液10~50μl...
...基因诊断可分为两类:一类是直接检查致病基因本身的异常。它通常使用基因本身或紧邻的DNA序列作为探针,或通过PCR扩增产物,以探查基因无突变、缺失等异常及其性质,这称为直接基因诊断,它适用已知基因异常的疾病;另一类是基因间接诊断。当致病基因...
...凝胶电泳无清楚的DNA或需确定DNA带的特异性时,可用标记的公用混合探针和(或)型特异探针作Southern吸印杂交、斑点杂交验证。按照标准方法制32p ATP标记的寡核苷酸探针,需达到约107cpm/pmol特异活性。杂交液中需含有2×...
...0.005%~0.05%, 加入0.02%叠氮钠(NaN3)防腐,此混合液置37℃24h,无需搅拌,结合完毕后加0.01mol/L赖氨酸中止反应。2.二步法(1)在含50~80mg铁蛋白的0.1mol/L磷酸缓冲液(pH7.0)中,加入稀释的戊二醛...
...胶体金与蛋白质的结合成功与否,取决于pH值,一般只有在蛋白质等电点(PI)略偏碱的条件下二者才能牢固地结合,因此,标记之前须将胶体金溶液的pH值调至待标记蛋白质的等电点略偏碱。需要提高胶体金的pH值时可用0.1molK2CO3,需要降低...
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