...适量1×TE溶解。如此可得线性化载体DNA。 （6）测定DNA的含量。 （7）加入线性载体DNA和含量3～4倍于载体的待插入DNA片段，连接缓冲液及T4连接酶适量至总体积为20μl，在12～14℃反应12～16h。 （8）连接反应液可置-20℃保存，供转化用。 （9）关于待插入DNA片段的获得参见附注。 （二）大肠杆菌感受态的制备及重组DNA的转化 1．感受...
... 球蛋白 和 纤维蛋白原 分子对称，故白蛋白粘性较低。白蛋白 等电点 为pH4.7，比 血浆蛋白 其他组分的PI低，所以在常用的弱碱性电泳 缓冲液 中所带负电荷多，加之分子量小，故电泳迁移速度快。 血浆白蛋白主要有两方面 生理 功能：①维持血浆 胶体渗透压 。因血浆中白蛋白含量最高，且分子量较小，故血浆中它的分子数最多。因此在血浆胶体渗透压中起主要作用，提供...
...50和38，较球蛋白和纤维蛋白原分子对称，故白蛋白粘性较低。白蛋白等电点为pH4.7，比血浆蛋白其他组分的PI低，所以在常用的弱碱性电泳缓冲液中所带负电荷多，加之分子量小，故电泳迁移速度快。 血浆白蛋白主要有两方面生理功能：①维持血浆胶体渗透压。因血浆中白蛋白含量最高，且分子量较小，故血浆中它的分子数最多。因此在血浆胶体渗透压中起主要作用，提供75－80...
...，从而使靶序列的扩增量降低。一般认为PCR反应中引物的终浓度为0.2～1μmol/L为宜，但我们实验发现，最适浓度远远低于此浓度。 （三） 缓冲液 PCR反应的缓冲液的目的是给Taq DNA聚合酶提供一个最适酶催反应条件。目前最为常用的缓冲体系为10-50mmol/L Tris-HCl (pH8.3-8.8,20℃) Tris是一种双极性离子缓冲液，20℃时...
...物，从而使靶序列的扩增量降低。一般认为PCR反应中引物的终浓度为0.2～1μmol/L为宜，但我们实验发现，最适浓度远远低于此浓度。 （三）缓冲液 PCR反应的缓冲液的目的是给Taq DNA聚合酶提供一个最适酶催反应条件。目前最为常用的缓冲体系为10-50mmol/L Tris-HCl (pH8.3-8.8,20℃) Tris是一种双极性离子缓冲液，20℃时...
...作用，生成 125 I + ，并标记在多肽、蛋白质酪氨酸分子上。 2．方法以标记蛋白质抗原为例。 （1）反应液组成：蛋白质2～5μg溶于磷酸缓冲液10～25μl中，加入Na 125 i 1m Ci(10μl)、乳过氧化物酶溶液25ng(10μl)、H 2 O 2 200ng(10μl)； （2）在室温保温7min； （3）加入H 2 O 2 200ng(10...
...定 （1）固定前用PBS—BSA冲洗5min×3。 （2）选择加入适合的固定剂；可为4%多聚甲醛+0.1%～0.5%戊二醛在pH7.4的磷酸缓冲液中。室温固定10～60min，或4 ℃ 30～120min。 （3）PBS—BSA冲洗5min×3。 （4）除去残留的自由醛基，选以下任一方法： ①0.5mg硼氢化钠/1ml PBS 10min（新鲜配制） ②0....
...发生特异性结合后，虽由亲水胶体变为疏水胶体，若溶液中无电解质参加，仍不出现可见反应。为了促使沉淀物或凝集物的形成，常用0.85％氯化钠或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液。由于氯化钠在水溶液中解离成Na + 和C1 － ，可分别中和胶体粒子上的电荷，使胶体粒子的电势下降。当电势降至临界电势（12～15mV）以下时，则能促使抗原抗体复合物从溶液中析出，形成可见的...
...发生特异性结合后，虽由亲水胶体变为疏水胶体，若溶液中无电解质参加，仍不出现可见反应。为了促使沉淀物或凝集物的形成，常用0.85％氯化钠或各种缓冲液作为抗原及抗体的稀释液。由于氯化钠在水溶液中解离成Na + 和C1 － ，可分别中和胶体粒子上的电荷，使胶体粒子的电势下降。当电势降至临界电势（12～15mV）以下时，则能促使抗原抗体复合物从溶液中析出，形成可见的...
...5 ℃干燥至恒重，减失重量不得过0.5 ％（附 录Ⅷ L）。 炽灼残渣 不得过0.2 ％（附录Ⅷ N）。 重金属 取本品1.0g，加醋酸盐 缓冲液 (pH3.5)2ml，混匀，与水适量 使溶解成 25ml， 依法检查（附录Ⅷ H第一法），含重金属不得过百万分。 【含量测定】 取本品约0.5g，精密称定，加 冰醋酸 15ml溶解后，加 结晶紫 指示液1 滴，用...
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