...体）进行定性、定位或定量检测，经过组织化学的呈色反应之后，用显微镜、荧光显微镜或电子显微镜观察。凡是能作抗原、半抗原的物质，如蛋白质、多肽、核酸、酶、激素、磷脂、多糖、受体及病原体等都可用相应的特异性抗体的组织、细胞内将其用免疫细胞化学手段检出和研究。 免疫细胞化学的突出优点是： 1.高度特异性 抗原抗体反应是特异性最强的反应之一，免疫细胞化学所用的抗体必须...
核酸分子探针的制备首先需要获得所要的特异性核酸或其片段。可用以下方法制备： （1）直接分离基因核酸：即从基因组上直接用内切酶切下所需基因。 （2）化学合成基因核酸：即以单核苷酸为原料，以固相磷酸三酯法合成某一结构完全清楚，分子量较小的寡核苷核。 （3）酶促合成核酸：在真核细胞中获得特异的结构基因。常用方法是以mRNA为模板，利用逆转录酶合成单链cDNA，再以...
...gen – negative specimens. J Ciln Microbiol, 1986；23：297 5. 白薇 静国忠. 应用点杂交技术对乙型 肝炎 病毒基因组进行定量分析.中华微生物学和免疫学杂志,1990；10：174 6.马立人刘耀清.光敏生物素核酸探针标记和检 测试 剂盒使用说明.军事医学科学院放射医学研究所,1989：6 7.马风林.生...
大肠杆菌核酸外切酶Ⅲ（exonucleaseⅢ）是从带3’-OH末端的双链DNA，按3’→5’方向切除5’单核苷酸： 大肠杆菌核酸外切酶Ⅶ则是从单链DNA的3’端和5’端切除寡核苷酸（两种形式）： （1）（2） 前一种酶需要镁离子作辅助因子才有活性；后一种酶则不需镁离子，因此即使在有螯合剂EDTA的情况下也有活性。另一种从噬菌体λ感染的大肠杆菌中提取的λ核酸...
核酸酶S1（nucleaseS1）主要是降解单链DNA或单链RNA。对单链DNA的活性更高。它的用途是切除DNA片段的单链末端使之成为平头末端，切 开合 成dscDNA时形成的“发夹”环以及分析DNA-RNA杂合子的结构。
核酸的多核苷酸链在次级键的基础上，还可形成更为复杂的二级及三级的高级结构。
DNA探针是最常用的核酸探针，指长度在几百碱基对以上的双链DNA或单链DNA探针。现已获得DNA探针数量很多，有细菌、病毒、原虫、真菌、动物和 人类 细胞DNA探针。这类探针多为某一基因的全部或部分序列，或某一非编码序列。这些DNA片段须是特异的，如细菌的毒力因子基因探针和人类Alu探针。这些DNA探针的获得有赖于分子克隆技术的发展和应用。以细菌为例，目前分...
...000～15000r/min）30min，除去上清液，再加入荧光抗体进行吸收，以免消耗过多的抗体。 肝粉或新鲜细胞吸收是一种非特异性的消除方法，对荧光抗体的荧光色素和蛋白都有吸附作用。如检查组织中的病毒抗原时，也可用相同的组织干粉或匀浆沉淀物吸收之。 用脏器肝粉吸收对荧光抗体损失较多，如果根据Hiramotos氏等的方法将组织的20%生理盐水匀浆液，用生理盐...
核酸 结构的基本单位是 核苷酸 （nucleicacid），每个核苷酸由1个 磷酸 、1个碳糖和1个 碱基 3部分组成。核酸有两类：一类是 脱氧核糖核酸 （ DNA ），DNA中的脱氧核糖核苷酸主要由4种碱基构成，即 腺嘌呤 (adenine,A)、 鸟嘌呤 （guanine,G）、 胞嘧啶 （cytosine,C）和 胸腺嘧啶 （thymine,T），此外...
（一）小鼠BALB/C系 它是此技术中最常用的动物。目前用于细胞融合的小 鼠骨 髓瘤细胞几乎都来源于BALB/C系小鼠。其杂交瘤可接种于BALB/C或它的杂交第1代小鼠，从带瘤动物取血清或 腹水 制备单克隆抗体。 BALB/C系小鼠起源于Bagg从1913年开始维持的白化株（Albine stock）小鼠，Dowell从1923年开始作近交系培育，至1932...
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