...感染诊断。 三、DNA探针 已广泛应用于检测CMV,其中以32P标记的探针敏感性最高,对某些标本来说,杂交方法可能比病毒分离更敏感。 四、聚合酶链式反应(PCR)...
...使用前最好加热至50℃,使其充分溶解后再加入探针分子。至于探针的浓度视实验目的、探针类型及标记方法而异。通常RNA探针分子浓度为0.5~2μg/ml,DNA探针浓度为1μg/ml,此外,如使用35S标记的探针,还需加入终浓度为100mmol/...
...1.吉昌华.特异单引物法标记高活性DNA探针.第四军医大学学报.1991:12:62~852.Sambrokk J, Fritch EF, ManiatisT.Molecular Cloning –a laboratory Manual....
...1.吉昌华.特异单引物法标记高活性DNA探针.第四军医大学学报.1991:12:62~852.Sambrokk J, Fritch EF, ManiatisT.Molecular Cloning –a laboratory Manual....
...原子吸收光谱法、离子微电极测定法、放射示踪法及标记示踪法等。目前常用标记示踪法,即用荧光探针标记靶细胞。常用的荧光探针有quin-2/Am、Fura-2/Am及Indo-1等。Fura-2/Am和Indo-1较为敏感。2.IP3的测定 采用3...
...短的重复顺序分别长16、17、32、33、37、41、62、64和376bp,但这些重复顺序几乎都共有一种“核心顺序”。“核心顺序”长10~15bp。如果人工合成很短的重复顺序作为DNA分子杂交的探针,同经限制性内切酶酶切的人体DNA作...
...方法不当,未能获得所要检测的靶DNA都会导致出现假阴性。但是如果待扩增标本中模板DNA浓度太高也会导致扩增失败。(二)引物PCR结果的特异性取决于引物的特异性,扩增产物的大小也是由特异引物限定的。因此,引物的设计与合成对PCR的成功与否起着...
...SLE病人,是一相对特异的诊断指标。鉴别或特异性检测抗dsDNA抗体取决于所用抗原dsDNA的特性和纯度,以前多用非致病的短膜虫及由此分离纯化的抗原,但目前除间接免疫荧光法外,多用基因工程产dsDNA抗原,其特异性更佳。血凝试验酶免疫是较常用的...
...(1)将整封染色体铺片放置于金网上,在70%的酒精蒸汽固定4~15h,空气干燥。(2)以强碱使DNA变性,将金网置于2×SSC内(应用0.1n NaOH调整至pH12),室温,2min。(3)脱水,以70%和95%酒精各冲洗3次,空气干燥...
...,再变性,印迹到硝酸纤维(Nc)滤膜上,用探针进行杂交,检测DNA的方法。自显影或显色用于DNA分析。以32P标记放射性探针为例,放射自显影观察结果。(图18-6)。图18-6 Southernblot体系前述分离、纯化的DNA样品5-10...
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