...具有新遗传物性的生物。遗传是由基因决定的,改建生物的遗传性,就是改建生物的基因,因此狭义的遗传工程就是基因工程。 对多数生物来说,基因本质是DNA,基因工程就是要改建DNA,涉及DNA序列的重新组合和建造,所以基因工程的核心就是人工的DNA重组(DNa recombination)。 图20-1 基本工程的基本程序 重组、建造的DNA分子只有纯化繁殖才有意义...
(一)载体 载体(Vector)是把外源 DNA (目的 基因 )导入 宿主 细胞 ,使之 传代 、 扩增 、表达的工具。载体有 质粒 (plasmid)、 噬菌体 、 单链 丝状噬菌体和 粘性末端 质粒(粘粒)、 病毒 等。载体具有能自我复制;有可选择的,便于筛选、鉴定的 遗传标记 ;有供外源DNA插入的 位点 ;本身体积小等特征。 质粒存在于多种 细菌 ...
任何一个有机反应过程,都包括原有的化学键的断裂和新键的形成。 共价键 的断裂方式有两种:均裂和异裂。 (一)均裂 共价键断裂后,两个键合原子共享的一对电子由两个原子各保留一个。这种键的断裂方式叫均裂。 均裂往往借助于较高的温度或光的照射。 由均裂生成的带有未成对电子的原子或原子团叫 自由基 或游离基。有自由基参加的反应叫做自由基反应。这种反应往往被光、高温或...
(一)载体 载体(Vector)是把外源DNA(目的基因)导入宿主细胞,使之传代、扩增、表达的工具。载体有质粒(plasmid)、噬菌体、单链丝状噬菌体和粘性末端质粒(粘粒)、病毒等。载体具有能自我复制;有可选择的,便于筛选、鉴定的遗传标记;有供外源DNA插入的位点;本身体积小等特征。 质粒存在于多种细菌,是染色体(核)以外的独立遗传因子,由双链环状DNA组...
...体 也增多增大。在 横纹肌 功能负荷加重时,不仅线粒体、粗面内质 网等 细胞器 及游离核蛋白体增多, 肌丝 也相应增多。此外, 细胞核 的 DNA 含量增加,导致核的增大和 多倍体 化, 核形 不规则。 肥大可分为 代偿性肥大 与 内分泌 性肥大二类。 1.代偿性肥大代偿性肥大通常系由相应器官的功能负荷加重引起,例如经锻炼的 骨骼肌 、 高血压 引起的 心肌...
...酸的情况不同,分为三类: Ⅰ类限制性核酸内切酶 由3种不同亚基构成,兼具有修饰酶活性和依赖于ATP的限制性内切酶活性,它能识别和结合于特定的DNA序列位点,去随机切断在识别位点以外的DNA序列,通常在识别位点周围400-700bp。这类酶的作用需要Mg2+,S腺苷甲硫氨酸及ATP。 Ⅱ类限制性核酸内切酶 与Ⅰ类酶相似,是多亚蛋白质,既有内切酶活性,又有修饰酶...
细胞 和组织在对各种 刺激因子 和环境改变进行适应时,能发生相应的功能和形态改变。
...,另一端有芳基叠氮化合物。此法适用于含氨基检测基团。其敏感性和光敏生物素标记探针相同,检测时需要抗DNP抗体和免疫化学显色。标记方法:(1)DNA不心变性,必须溶于水中,取2~10μg10μl,加入二甲亚砜25μl,每微克DNA加入光敏DNp 2μg(在避光条件下),混匀。(2)置入冰浴中,在特制灯10cm下照射10min。(3)加入水165μl,4mol/...
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在一个典型的PCR反应体系中需加入:适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐热性多聚酶、Mg 2+ 和两个合成的DNA引物。模板DNa 94℃变性1min,引物与模板40~60℃退火1min,72℃延伸2min。在首次循环前模板预变性3~5min;在末次循环后,样品仍需继续延伸3~5min以上,确保扩增的DNA为双链DNA。为便于了解PCR反应中各...
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