...凝集素的特性及标记原理详见第五章 ,近年来,凝集素电镜标记技术应用日益广泛,且获得较为满意的效果。凝集素电镜标记技术方法较多,常用的有凝集素—酶(常用为HRP)、凝集素—生物素—酶电镜标记技术。现将凝集素—酶电镜标记技术(包埋前染色)简介...
...通过大肠埃希菌繁殖而增殖重组质粒,也是扩增核酸的手段。但在试管中有效扩增DNA的方法,是在90年代才开展起来的多聚酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)新技术。由于PCR灵敏度高、特异性好、操作方便,在我国...
...分化抗原如表21-1所示。表21-1 T胞表面主要CD抗原及其特异性CD抗原特 异 性CD2E受体、全部T细胞和部分NK细胞CD3成熟T细胞CD4T(辅助/诱导)细胞、Mφ、HIV受体CD8T(杀伤/抑制)细胞、NK细胞的亚型CD25活化T...
...(1)基本原理:ABC法是Hsu 等于1981年在HRAB法和LAB法的基础上改良的,其特点是利用抗生物素分别连接生物素标记的第二抗体和生物素标记的酶。与LAB法和BRAB法不同的是第一抗体不为标记物所标记,生物素标记的第二抗体与ABC...
...5min。③PBS洗2次,各1min。④荧光抗体反应1min(同步骤2),放5min 。⑤PBS洗2次,各1min。⑥缓冲甘油封片。荧光显微镜检测。(3)结果:阳性为黄绿色荧光,阳性为红色。微波炉型号不同,应经预实验选定强度和时间。...
...1.SSC(Standard Saline Citrate, SSC)通常配成10×,20×,50×的储备液,如下:配制:先称取上述两种试剂,溶于约800ml ddH2O中,滴加10N的NaOH,将pH值调至7.0,补足ddH2O至...
...SSC,10%(0.1%)SDS洗脱。主要是洗去残留的RNA,降低背景。用于以RNA为探针的原位杂交方法中。4.Dig标记探针杂交后处理液用ddH2O溶液并定容至1000ml。用ddH2O溶解并定容至1000ml。配制同上。左旋咪唑有消除...
...10-6克)、毫微克(10-9克),甚至以微微克(10-12克)计算。 放射免疫测定法(RIA)它开创了医学检测史上微量测定方法的新纪元,在我国医学检验领域应用得非常广泛。检测成本低廉是这种方法的优点。但是,RIA法存在着放射性辐射和标记物...
...不论使用何种制备方法,要获得合格的标记化合物,都必须将反应物经过仔细的分离、纯化。另外,一些标记化合物,经过一定时间的存放后,往往会出现不纯物,而需再纯化。如碘标记生长激素(125--HGH),在刚标记的第2天,从Sephadex G-...
...D-loopregion)的“DNA”指纹图”。PCR技术由Mullis等首创(详见第二十二章 )。它又称为DNA体外扩增技术,是用DNA聚合酶在体外扩增一段DNA顺序达百万倍以上。这样就可直接观察而不用印迹杂交法。这项技术的基本原理是,将有待扩增的DNA分子...
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