免疫化学方法是利用抗原与其相应抗体具有特异结合的特性,用荧光素、酶、发光素、同位素、胶体金标记某种抗原的抗体,借助荧光显微镜、电镜、图像分析仪、同位素监测仪、分光亮度仪便可对组织中的抗原进行定性或定量,可用于胶原、蛋白多糖、弹性蛋白、粘连蛋白、血浆成分的定位和定量分析。 1.抗原提取及单克隆抗体的制备(从略)。 2.抗体的标记:基本原理是将抗体与标记物以共价...
免疫化学方法是利用抗原与其相应抗体具有特异结合的特性,用荧光素、酶、发光素、同位素、胶体金标记某种抗原的抗体,借助荧光显微镜、电镜、图像分析仪、同位素监测仪、分光亮度仪便可对组织中的抗原进行定性或定量,可用于胶原、蛋白多糖、弹性蛋白、粘连蛋白、血浆成分的定位和定量分析。 1.抗原提取及单克隆抗体的制备(从略)。 2.抗体的标记:基本原理是将抗体与标记物以共价...
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。 由于一般荧光测定中的本底较高等问题...
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。 由于一般荧光测定中的本底较高等问题...
荧光免疫技术是标记免疫技术中发展最早的一种。很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合,利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。 由于一般荧光测定中的本底较高等问题...
...细胞中β细胞损伤的标志。抗胰岛细胞抗体常用间接免疫荧光法测定,荧光图形的特点是胰岛细胞胞质呈斑点状着染。 间接免疫荧光法实验原理: 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。 第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体。 第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗I...
...细胞中β细胞损伤的标志。抗胰岛细胞抗体常用间接免疫荧光法测定,荧光图形的特点是胰岛细胞胞质呈斑点状着染。 间接免疫荧光法实验原理: 将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。 第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体。 第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗I...
上述各种方法制备酶标抗体时,除产生酶标抗体外,还有未标记的抗体蛋白、游离酶、酶二聚体及偶联剂等。这些均可使酶标抗体的敏感性下降,故酶标抗体须经纯化后应用。现简介几种常用的纯化方法。 1.多聚体的分离实验中,不同的试剂形成的多聚体的数量各异,即使同样的实验药物和程序,在不同的时间制备的酶标抗体中,多聚体的数量亦不相同。多聚体较单体含酶量多,与组织的非特异吸附增...
...floutescencepolarizationimmunoassay,FPIA),用于小分子物质特别是药物的测定。 FPIA的试剂为荧光素标记的药物和抗药物的抗体,模式为均相竞争法,标本中的药物与荧光标记的药物与一定量的抗体竞争结合。反应平衡后,与抗体结合的荧光标记药物的量与标本中药物浓度的量呈反比。由于抗体的分子量远大于药物的分子量,游离的荧光标记药物与...
...以再与其它化学物质发生反应。蓝色的亚铁氰化铁与棕色的DAB产物及黑色的银颗粒颜色对比明显,因此强结合免疫酶及IGSS进行光镜下抗原的双标及多标记。胶体铁(颗粒1nm)标记抗体直径比常用胶体金(5~40nm)及铁蛋白标记抗体(12nm)小,因而对固定组织具有更好的穿透力,可用于抗原的超威结构定位,尤其是免疫电镜的包埋前染色。结合免疫酶及不同大小胶体金标记抗体,...
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