...13-5 VNTR导致的RFLP重复次数的变异致酶切位点的移动和DNA片段长度的变异VNTR具有高度的变异性,同时也是按照孟德尔方式遗传的,因此是很好的遗传标记,由于它们类型众多和在基因组中分布广泛,因而在基因连锁诊断中应用日益广泛。...
...Kbaffan等(1986)首先创立了蓝色荧光素标记和染色技术,可进行双标记或多标记。(1)取7-氨基-4-甲基香豆素(7-amino-4-methyl coumarin, AMC)260μg溶于二甲亚砜25μl中。(2)将上液加入10...
...有放射免疫和酶免疫两种,国内仅有前者生产。放射免疫法测定地高辛所用的标记物有3H和125I两种。前者半寿期长,试剂保存期长,但测定需昂贵的液闪计数仪,且易受样本中内源性物质化学发光或色淬灭干扰。125I标记试剂盒虽半寿期短,但测定只需用γ...
...脑膜炎双球菌、肺炎双球菌等的实验诊断均有较好的效果(如表16-1)。利用间接免疫荧光或酶标记抗体法,检测患者血清中的抗体更有价值,广泛用于临床诊断和流行病学研究。表16-1 免疫荧光细胞化学方法在细菌诊断中的应用评价菌种疾病标本方法敏感性...
...由于酶标抗体存在一些缺点,例如①酶与抗体间的共价连结可损害部分抗体和酶的活性;②抗血清中的非特异性抗体被酶标记后,与组织成分结合,可致背景染色等。为此Sternberger等在酶标法的基础上,发展了非标记抗体酶法。包括酶桥法(Enzyme...
...生物活性物质已建立了RIA。它几乎能应用于所有激素的分析(包括多肽类和固醇类激素),还能用于各种蛋白质、肿瘤抗原、病毒抗原、细菌抗原、寄生虫抗原以及一些小分子物质(如环型核苷酸等)和药物(如地高辛、毛地黄甙等)的分析,应用范围还在不断扩展。近年来...
...在同一细胞组织标本上需要同时检查两种抗原时,要进行双重荧光染色,一般均采用直接法,将两种荧光抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合,加在标本上孵育后,按直接法洗去未结合的荧光抗体,抗A抗体用异硫氰酸荧光素标记,发黄绿色荧光;抗B抗体用...
...用免疫斑点法或免疫细胞化学染色等方法可鉴定抗体的标记效果1.免疫斑点法 在处理好的硝酸纤维素膜上分别滴加100~10-7系列稀释的抗原,斑点直径0.25cm, 空气中干燥,80℃多聚甲醛蒸气固定1h,然后分别以胶体铁标记的抗体一步法或用桥...
...-dUTP标记到合成的寡核苷酸探针片段3′-OH端。反应体系含:140mmol/L二甲胂酸钠,30mmol/l Tris-HCl(pH 7.6),100μmol/L Bio-11-dUTP,0.1μmol/L 寡核苷酸片段,0.05%BSA...
...胶体铁的呈色产物亚铁氰化铁是一络合物(解离常数1×10-35),一经形成,难以再与其它化学物质发生反应。蓝色的亚铁氰化铁与棕色的DAB产物及黑色的银颗粒颜色对比明显,因此强结合免疫酶及IGSS进行光镜下抗原的双标及多标记。胶体铁(颗粒1...
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