...的某种核苷酸α磷酸基。但近年来已发展了一些用非同位素如生物素、地高辛配体等作为标记物的方法。但都不及同位素敏感。非同位素标记的优点是保存时间较长,而且避免了同位素的污染。最常用的探针标记法是缺口平移法(nicktranslation),其...
...标记抗体与抗原的结合,也可在光镜和电镜下观察(图1-7)。图1-6 大鼠腺垂体免疫组织化学(PAS法)示生长激素细胞(上海医科大赵培林教授供图)图1-7 免疫细胞化学(蛋白A-胶体金法)和原位杂交术示大鼠垂体催乳素细胞电镜像 N催乳素细胞核↑...
...Pharmacia)可取代Amberlight CG-50用于纯化标记抗体(杨守京,等,1992)。三、胶体铁标记抗体的鉴定用免疫斑点法或免疫细胞化学染色等方法可鉴定抗体的标记效果1.免疫斑点法 在处理好的硝酸纤维素膜上分别滴加100~10...
...进行细胞膜受体的定位。(二)免疫标记方法金属类标记物的免疫标记法同切片免疫染色,即将标记物与抗体相结合,通过直接或间接法显示抗原部位。胶体金可与蛋白A相结合后与IgG分子中的Fc 段相结合。哪与卵白素(a-vidin)相结合可与结合抗体的...
...使用方便、安全、检测速度快。(三)微孔板夹心杂交法该法是通过一固定于微孔板的捕获探针与PCR产物的某一区域特异杂交使产物间接地固定于微孔板上。然后,再用一生物素等非放射性标记物标记的检测探针与产物的另一区域杂交,漂洗后显色即可判断结果,该法需要两...
...由于IEF法需大型设备,工作量较大,极大地限制了该法的临床应用。免疫印迹法为目前检测ApoE表型最常用方法。此法直接用血清(或血浆)作为样品,脱脂后进行IEF电泳,然后用特异性多克隆或单克隆抗体进行免疫印迹反应,根据黑色后图谱即可确定...
...缓冲(0.5mol/L碳酸盐缓冲液pH9.0~9.5)甘油封固、镜检4.对照染色①正常免荧光血清染色,如上法处理切片,结果应为阴性。②染色抑制试验(一步法):将荧光抗体和未标记的抗体球蛋白或血清(相同)等量混合,如上法处理切片。结果应为阴性。...
...免疫抑制治疗有一定的价值。ASA常用间接免疫荧光法检测。 间接免疫荧光法实验原理:将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。 第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗体充分结合,然后...
...简便省时,细胞抗原保存较好。缺点是细胞分布不均匀,玻片上细胞重叠,影响标记效果。2.穿刺吸取涂片法主要应用于实质器官的病变区,如肝、肾、肺、淋巴结、软组织等。用细针穿刺吸取病变区内液体成分,如穿刺液较少,可直接涂抹在载玻片上,力求细胞分布...
...抗体的活性;③不能因偶联剂的加入,使酶与组织成分了生非特异结合。在HRP标记抗体中,常用的偶联剂有戊二醛、过碘酸钠及Maleimide等,现简介如下。1.戊二 醛标记法戊二醛为制备各种酶标抗体最常用的偶联剂。市售戊二醛往往含有戊二酸、丙烯释及...
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