PCR技术的出现给克隆的筛选增加了一个新手段。如果已知目的序列的长度和两端的序列，则可以设计合成一对引物，以转化细胞所得的DNA为模板进行扩增，若能得到预期长度的PCR产物，则该转化细胞就可能含有目的的序列。
在一个典型的PCR反应体系中需加入：适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐热性多聚酶、Mg 2+ 和两个合成的DNA引物。模板DNa 94℃变性1min，引物与模板40～60℃退火1min，72℃延伸2min。在首次循环前模板预变性3～5min；在末次循环后，样品仍需继续延伸3～5min以上，确保扩增的DNA为双链DNA。为便于了解PCR反应中各...
...冻干燥技术、喷雾干燥技术、喷雾冷冻干燥技术及超临界流体技术等。其中，超临界流体溶液快速膨胀（RESS）技术在药剂研究中的应用越来越广泛，以在制备药物超细微粒的研究最多，大约占78％以上。那么，这种技术究竟有什么优越性，目前的研究应用情况如何？带着这些问题，记者采访了沈阳药科大学药学院唐星教授。 ■诠释成粒过程 唐星教授解释说，RESS技术是在超临界流体萃取分...
单克隆抗体技术曾使免疫学理论与实践有了新的突破，近几年来PCR技术使分子生物学及相关学科发生了一次方法学的革命。在不到10年的时间内，在以下几个领域中PCR技术已具有实用价值，且其应用范围正在不断扩大中。 1．遗传病的产前诊断 用胎儿羊膜细胞，羊水或甚至母血可以检查胎儿的性别，这在与性染色体关联遗传病诊断中是必要的。对于高发的遗传病，如 地中海贫血 、镰刀状...
制备颈围的材料一般无严格要求，可用硬纸板、泡沫塑料、硬塑料片、皮革、毛毡或其它类似物品。基本要求以柔软、透气、不怕水、并具有韧性的材料为佳。一般以硬纸板最为常用。按患者自身颈部的长短、粗细尺寸，剪成后宽前窄的长条形，长度大约是颈部周径再加10cm，宽度可适当宽些，约为10～14cm左右，颈后近杭部可弧形升高1～2cm。裁剪试戴合适后，边缘以清洁的 棉花 衬垫...
RNA的多聚酶链式反应（RT-PCR）是以RNA为模板，联合逆转录反应（reverse transcrip－tion, RT）与PCR，可用于检测单个细胞或少数细胞中少于10个拷贝的特异DNA，为RNA病毒检测提供了方便；并为获得与扩增特定的RNA互补的cDNA提供了一条极为有利和有效的途径。 RNA扩增包括两个步骤：①在单引物的介导下和逆转录酶的催化下，合...
...毒。4℃只能短期保存。 病毒作为一感染因子与细菌并没有什么区别，最终使机体患病。它主要通过皮肤、呼吸道，消化道而进入机体。那么，如何采取病毒标本呢？常用的病毒标本有脑脊液、咽喉洗液、血液、粪便等。应根据疾病性质来决定采取哪种标本。 1、上呼吸道感染应采取咽喉洗液。洗漱液是用生理盐水（0．9％）或自配淡盐水15毫升。方法是，先让病人咳嗽，然后以洗漱液反复洗漱咽...
此部分内容包含以下子章节，请点击标题阅读: 血液标本采集法 尿标本采集法 粪便标本采集法 痰标本采集法 分泌物培养标本采集法
...已成功地克隆了猪尿酸氧化酶基因、 糖尿病 相关肽基因和哺乳动物与 禽类 的嗜肝病毒基因。用脱氧肌苷（deoxyinosine；DI）引物进行PCR，可以代替编码蛋白的多种兼并密码子中的兼并碱基，DI的特异性主要受cDNA浓度影响。 表22-4 密码兼并性 氨基酸 密码子数 M、W 1 C、D、E、F、H、K、N、Q、Y 2 I 3 A、G、P、T、V 4 L...
...风气治之，中见少阳；少阴之上，热气治之，中见太阳；太阴之上，湿气治之，中见阳明。所谓本也。本之下，中之见也；见之下，气之标也。本标不同，气应异象。（运气六。） 风行于地，所谓本也，余气同法。本乎天者，天之气也；本乎地者，地之气也。（运气二十四。） 春夏先治其标，后治其本；秋冬先治其本，后治其标。（论治二。） 病为本，工为标，标本不得，邪气不服。（论治十五。）
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