...-CH=N-半抗原 3.氯甲酸异丁酯法该法又称为混合酸酐法,是利用半抗原上的羧基和载体蛋白上的氨基以肽链相连接,方法简便,多用于类固醇抗原的制备,其反应如下: (三)无羧基和氨基半抗原衍生物的制备 某些类固醇和药物,需加以适当的改造,使其转变为带有羧基或氨基的衍生物。依据半抗原的性质有如下4种方法。 1. 琥珀 酸酐法 琥珀 酸酐是琥珀酸的 脱水 产物,遇水...
胶体金标记蛋白质的原理,一般认为是由于pH值等于或稍偏碱于蛋白质等电点时,蛋白质呈电中性,此时蛋白质分子与胶体金颗粒相互间的静电作用较小,但蛋白质分子的表面张力却最大,处于一种微弱的水化状态,较易吸附于金颗粒的表面,由于蛋白质分子牢固地结合在金颗粒的表面,形成一个蛋白层,阻止了胶体金颗粒的相互接触,而使胶体金处于稳定状态,如果=低于蛋白质的等电点时,蛋白质带...
国外已有数篇Hp单克隆抗体研制成功的报道。Negrini等把从培养皿中分离的6株Hp混合后免疫小鼠,32d后将小鼠脾细胞与小 鼠骨 髓瘤细胞P 3 X63.Ag8.653融合,细胞融合悬液于96孔板上培养生长杂交瘤细胞集落,用整个Hp作靶细胞的间接ELISA法筛选抗体,共获得21株阳性单克隆抗体,其中以CB-26为最好。 研究证明单克隆抗体CB-26具有很强...
1975年Kǒhler和Milstein首先报道用细胞杂交技术使经绵羊红细胞(SRBC)免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,建立起第一个B细胞杂交瘤细胞株,并成功地制得抗SRBC的单克隆抗体(monlclonalantibody,McAb)。迄今世界已研制成数以千计的McAb。 单克隆抗体的理化性状高度均一,生物活性单一,与抗原结合的特异性强,便于人为处理和质...
...蛋白质多为复杂的蛋白组分,免疫前需进行纯化。蛋白质纯化方法在生物化学技术中已有详述,本章主要介绍免疫化学纯化方法。 (一)组织和细胞粗抗原的制备 免疫原多来源于只类及动物的组织或细胞,这些材料在取得可溶性蛋白质之前,必须先进行处理,以适合于进一步纯化。 1.组织细胞抗原的制备所用组织必须是新鲜的或低温(<-40℃)保存的。器官或组织得到后立即去除表面的包膜或...
...相附。因此环境pH和离子强度是影响吸附的主要因素,其他如胶体金颗粒的大小、蛋白质的分子量及蛋白质浓度等也会影响蛋白质的吸附。 (二)免疫金的制备 1.用0.2mol/LK 2 CO 3 或0.1mol/LHC1调节胶体金溶液的pH至选定值。原则上可选择待标记蛋白质等电点,也可略为偏碱。但通常最适反应pH往往需经多次试验才能确定。 在调节胶体金的pH值时应注意...
制备单克隆抗体是复杂而费时的工作,整个技术流程如图11-2。 (一)抗原提纯与动物免疫 对抗原的要求是纯度越高越好,尤其是初次免疫所用的抗原。如为细胞抗原,可取1×10 7 个细胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐剂并经充分乳化,如为聚丙烯酰胺电泳纯化的抗原,可将抗原所在的电泳条带切下,研磨后直接用以动物免疫。 选择与所用骨髓瘤细胞同源的BALB/c健康小...
目前全球掀起的 芦荟 Aloe热, 芦荟 广泛应用于食品、化妆品、日化、医药等行业。现代科学技术拓展了芦荟的使用价值,不断开发出新的功效。芦荟的化学成分十分复杂,据有关研究资料报道,到目前为止被测知的化学成分已超过160种。主要有蒽醌类化合物,多糖类,凝胶类,矿物质类,氨基酸类。 中国的芦荟产业从上世纪初80年代开始刚刚起步,目前尚处于极初级发展阶段 。主要...
瑞典Jarchem化学品公司的科学家们研制出一种从天然蔬菜中提取的润肤原料,它具有与羊毛脂一样的柔软光滑以及保湿滋润肌肤的功效。 这种润肤剂可以作为羊毛脂的替代原料,应用于护肤品中,可以显着改善皮肤质感,也可以加入到唇膏配方中,长久保持唇膏的光泽。该润肤剂作为羊毛脂的替代物,其质地、结构、光泽、发泡性和吸水性能均比羊毛脂高出150%以上。并且,它味道极淡,适...
... 药酒 、口服液等剂型应用时,多采用50度 白酒 或低度醇浸提,其醇提后残渣多被弃掉。为了开展对枸杞的综合利用,我们从吉林产的枸杞制药废渣中提取出粗多糖,并对其进行了组分鉴定与相关成分分析。 1 材料与仪器 材料为吉林省通榆产枸杞(系指吉林省通榆县引种的茄科植物宁夏枸Lycium barbarum L.的干燥成熟果实。以下简称吉林枸杞,经50度白酒提取后的制...
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