...Clayton等于1989年首次在大肠杆菌内构建了Hp的DNA基因库。他们筛选出一株能同特异性抗血清反应的阳性克隆（γcp2）。该克隆的表达产物系Mr66 000的多肽片断。免疫印迹分析多肽能同特异性Hp抗血清反应。将该DNA提取物经内切...
...%蔗糖或甘油溶液作密度梯度离心，分带收集不同大小颗粒的胶体金标记蛋白制剂。几种免疫金探针离心所用转速（见表5-6），离心纯化时所用转速见表5-7，胶体金的OD值见表5-8。表5-6 几种免疫金探针离心时所用转速参考表胶体金颗粒直径（nm）...
...用FITC标记，B抗原的抗体用罗达明标记，可采用以下染色方法：1．一步法双染色 先将两种标记抗体按适当比例混合（A+B），按直接法进行染色。2．二步法双染色 先用RB200标记的B抗体染色，不必洗去，再用FITC标记的A抗体染色，按间接法...
...’→3外切酶活性，也不能用单链DNA作为模板。2．噬菌体DNA聚合酶这里以T4DNA聚合酶为例。它也具有5’→3聚合酶活性，但它的外切酶活性比大肠杆菌的要高200倍。因此，它也可用来补齐单链末端或标记同位素。（二）RNA聚合酶RNA聚合酶（...
...根据具体情况采取不同的方法将标记蛋白质（或多肽）与未反应的游离放射性碘及受损伤的标记物分开，常用的方法有凝胶过滤、离子交换层析、吸附层析、各种电泳法等。（二）乳过氧化物酶法（LPO）本法反应温和，对抗原、抗体免疫活性影响小，已被广泛应用。缺点...
...等用斑点杂交法评价了同位素与非同位素标记Hp全基因探针的实用性。Mortomi等通过DNA-RNA杂交方法，用人工合成的Hp特异性寡核苷酸探针，同16SrRNA序列互补，证实这种探针比较敏感，可以检出少至5000个～10000个Hp。近年来...
...标抗体作为二抗，通过银染或放射自显影技术显示Apo（a）蛋白区带，但此类方法已较少使用。将生物素标记的抗体作为二抗，通过生物素-亲和素系统放大信号，可大大提高检测敏感性。血清标记贮于4℃一周或贮存于-80℃一年内仍可检出Apo（a）遗传表型...
...联结起来，常用的双功能试剂有间苯二甲基二异氰酸盐（简写XC）。甲苯2，4二异氰酸盐（简写TC）。邻茴香胺（简写BDD）；对，二氟一间，间，二硝基二苯矾（简写FNPS）和戊二醛。近年来，普遍认为戊二醛作为联结剂效果较好，对抗体活性影响小，标记...
...BSA可以保证扩增结果，但效率不一定很高。明胶（至少0.0001%）,对扩增1kb左右的靶DNA十分重要。但对小片段扩增结果影响不大。不同的样品提取方法或固定法对Slide-PCR都可行。Silde-PCR的机理可能是在起始变性过程中一部分...
...整合于染色体上也可出现在质粒DNA中，而后者居多，称之为产青毒素酶质粒，质粒有二种，大小分别为7.4kb和5.3kb。Pescador1998年设计一特异的检测淋球菌编码β-内酰胺酶基因的探针，采用酶化学发光法标记，液相杂交，用测光计测是特异...
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