...当单份血清标本已确定既往有CMV感染时,应当立即留血清标本,以及间隔2周、4周、8周再留血清标本,结合病毒分离可作原发感染诊断。 三、DNA探针 已广泛应用于检测CMV,其中以32P标记的探针敏感性最高,对某些标本来说,杂交方法可能比病毒分离更敏感。 四、聚合酶链式反应(PCR) (一)标本的采集及处理 采集的标本包括患者的血液、尿,以及腺体组织等。由全血制...
...核苷酸启动法(Oligonucleotide-priming method)是Koch(1987)首先提出的,其基本原理是将未标记的寡核苷酸探针与细胞或组织中的靶DNA或RNA进行杂交,然后该寡核苷酸探针充当引物的作用,在Kelow多聚合酶的催化作用下,将生物素(或地高辛、荧光素)标记的核苷酸编入,以达到原位显示的目的。PRINS技术具有3个方面的优点:首先...
...切后至少会生成100万个片段,多的可达1000万个片段。如果其中有一、二个片段发生改变,不可能从电泳凝胶上直接观察分辨。此时就必定要用合适的探针。某个目的基因或某一特定的DNA片段,在同酶切后的DNA作分子杂交后,可在曝光的X线片上看到RFLP。图23-8是用分子杂交法检测RELP示意图。 图23-8 分子印迹杂交法则 RFLPs的示意图 这是通过限制酶A识...
...7012 454 33 6539 6987 448 M=A+C, R=A+G,W=A+T,Y= C+T 表2列述了Manos等设计的寡核苷酸探针。公用混合探针序列选自HPVL1区中另一保守序列,可与 MY11和MY09引物产生的多种HPVL1 PCR扩增产物杂交:型特异探针只与相应HPV型有互补序列,用于检出的HPV分型。 表2 Manos等设计的HPVL1...
...胞 中并不表达,给PKU的 产前诊断 带来了困难。 由于诊断 分子 生物学 技术的发展,1983年胡流清等人完成了人苯丙氨酸羟化酶cDAN 探针 的制备。他们利用探针和Southern blot技术进行 分子杂交 ,通过限制性片段长度 多态性 (restriction fragment-length polymerphism ,RFLP)分析实现了PKU的产...
...毛细胞或羊水细胞中并不表达,给PKU的产前诊断带来了困难。 由于诊断分子生物学技术的发展,1983年胡流清等人完成了人苯丙氨酸羟化酶cDAN探针的制备。他们利用探针和Southern blot技术进行分子杂交,通过限制性片段长度多态性(restriction fragment-length polymerphism ,RFLP)分析实现了PKU的产前基因诊断...
...3 CAGGTAACGGATGCTGAGT 256-275 TP4 CGTGGCAGTAACCGCAGTCT 762-741 bmpTP5(探针) GACCTGAGGACTCTCAAATC 500-519 TP7 CTCAGCACTGCTGAGCGTAG 172-191 TP8 AACGCCTCCATCGTCACACC 788-769 F1 CTCTTCAA...
... CAGGTAACGGATGCTGAGT 256-275 TP4 CGTGGCAGTAACCGCAGTCT 762-741 bmpTP5( 探针 ) GACCTGAGGACTCTCAAATC 500-519 TP7 CTCAGCACTGCTGAGCGTAG 172-191 TP8 AACGCCTCCATCGTCACACC 788-769 F1 CTCTTCA...
...粒细胞增多。 其他辅助检查: 1、组织病理检查。 2、B型超声检查示子宫增大,宫腔内有液性暗区,内有强光点。 3、腹腔镜、宫腔镜检查。 子宫探针检查一般子宫探针插入宫颈内约l—3厘米处即有阻力感,以2厘米左右为最多见。阻力可按 宫腔积脓 不同而异,仅内宫腔积脓探针很易插入;宫腔积脓时须按子宫方向稍用力方能将探针插入;如感组织韧硬,探针不易插入时,不可盲目用力...
...靶序列直接扩增出来呢?Kwok等 人发 明了TAS来解决这一问题。结合应用葡聚糖珠寡核苷酸杂交技术可进一步提高方法的特异性和效率。其原理是:制备引物A、B,引物A与待检RNA3’端互补,并有一T 7 RNA多聚酶的识别结合位点。逆转录酶以A为起点合成cDNA;引物B与此cDNA3’端互补,逆转录酶同时还具有RnaseH和DNA多聚酶的活性,又可利用引物B合成...
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