...文章指出,荧光探针和光学显微镜的进步使这一技术在生物医药领域的应用范围不断扩大。一方面,新的荧光探针的出现,包括绿色荧光蛋白及其衍生物,几乎提供了可标记任何生物医学研究者感兴趣的材料的方法;另一方面,成像系统,包括新的成像模式、软件、计算机和...
...被称为中性突变。分子生物学技术的不断发展已使得从DNA水平直接分析这类突变成为可能。目前应用较多且成熟的方法是限制性片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)。即当DNA序列...
...总体积为20μl,在12~14℃反应12~16h。(8)连接反应液可置-20℃保存,供转化用。(9)关于待插入DNA片段的获得参见附注。(二)大肠杆菌感受态的制备及重组DNA的转化1.感受态的制备(1)接种单菌落于2mlLB培养液中, 37...
...诊断疟疾的一种快捷及特异方法。用同位素标记的DNA 探针可检出10pg 纯化的疟原虫DNA 或极低水平的疟原虫血症。 其他辅助检查: 1.哮喘型 X 线胸片见有程度不等的肺过度充气征。 2.支气管炎型 X 线胸片常呈肺纹理增强,有报道出现此...
...这些多肽产生的抗血清仅同Hp反应。表达这些抗原的DNA经用32p标记显示仅能同Hp菌株杂交。用亲和纯化的尿素酶多克隆抗体的免疫印迹显示这些克隆的抗原是尿素酶分子的一部分,但并无尿素酶活性。用上述DNA探针和重组DNA表达Hp特异性抗原对探知...
...分析、探针制备等。注意事项:①DNA样品纯度高,Taq酶(和Klenow酶)有逆转录酶活性,DNA和RNA不能混在一起。②设计的引物分子内(特别3′端)和引物,1,2分子间不形成双链。选择性好,不增幅目的DNA以外区域的DNA。引物的G+C...
...17-1 直接免疫荧光法原理示意图2.间接法可用于检测抗原和抗体,原理见图17-2。本法有两种抗体相继作用,第一抗体为针对抗原的特异抗体,第二抗体(荧光抗体)为针对第一抗体的抗抗体。本法灵敏度高,而且在不同抗原的检测中只需应用一种荧光抗体。图...
...是组织细胞已经合成的物质(过去时),本身不能说明阳性组织细胞目前的功能状态,亦无法预测细胞将合成何种物质,发挥什么功能,因此,单纯的ICC法存在着被动性。近年来,ICC法与原位杂交技术结合,使细胞内活性DNA可视化,直接显示某染色体上,何种...
...小时内完成。作用把含某种多肽或蛋白的cDNA片段的质粒,按照第十九章 在光照下标记光敏生物素,然后经DNA酶消化1h,得到大量100~500bp长度的混合片段,变性后用于原位杂交。如为培养细胞或细胞涂片,用95%乙醇、5%乙醇固定5min,...
...鉴定临床分离的Hp菌株方法。该方法简单快速、敏感性强、图形简单、易于比较。PCR—SSCP不仅可以用于大规模的Hp流行病学调查,而且能准确评估治疗后再现的Hp是复发还是再感染。中山医大一院应用随机引物扩增的DNA多态指模技术鉴别不同菌株的Hp...
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