（一）基本原理 在地高辛标记核酸探针广泛用于光镜水平的原位杂交试验并获极为满意的结果后，科学工作者试图将其应用于电镜水平。其基本原理和生物素标记核酸探针-PA-Gold电镜杂交技术的基本原理相似，首先利用地高辛修饰核酸探针，与细胞或组织进行杂交，再用抗地高辛抗血清相连胶体金与之结合，进行细胞或组织特异核苷酸的超威结构定位。为增强金的显示效应，可用银加强法增强...
基因工程的基本技术是人工进行基因的剪切、拼接、组合。基因是一段具有一定功能的DNA分子，要把不同基因的DNA线形分子片段准确地切出来，需要各种限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）；要把不同片段连接起来，需要DNA连接酶（ligase）；要结合基因或其中的一个片段，需要DNA酶（DNa polymerase）等。因此，酶是DNA...
用放射免疫分析进行测定时分三个步骤，即抗原抗体的竞争抑制反应、B和F的分离及放射性的测量。 （一）抗原抗体反应 将抗原（标准品和受检标本）、标记抗原和抗血清按顺序定量加入小试管中，在一定的温度下进行反应一定时间，使竞争抑制反应达到平衡。不同质量的抗体和不同含量的抗原对温育的温度和时间有不同的要求。如受检标本抗原含量较高，抗血清的亲和常数较大，可选择较高的温度...
溶酶体为细胞浆内由单层脂蛋白膜包绕的内含一系列酸性水解酶的小体。是细胞内具有单层膜囊状结构的细胞器，溶酶体内含有许多种水解酶类，能够分解很多种物质，溶酶体被比喻为细胞内的“酶仓库”“消化系统”。溶酶体内的酶都是水解酶，而且一般最适pH为5，所以都是酸性水解酶。溶酶体内的酶如果释放会把整个细胞消化掉。一般不释放到内环境，主要进行细胞内消化。先天性溶酶体病是由于...
Angerer及其同事们首先应用RNA探针于原位杂交（见Cox et al 1984），核酸探针为单链的RNA分子，产生自具有质粒逆转录系统的cDNA克隆（图20-2）。由于它是单链的，不像双链的DNA探针，在溶液中不会再退火（reanneal），因此，较大百分比的探针可参与杂交反应，较cDNA探针的信号强。除此之外，在溶液中产生的cRNA-mRNA杂交体比...
针对外来抗原的抗体分子（Ab1）可变区上Id可刺激机体产生相应的抗Id抗体（Ab2）。Ab2β具有与外来抗原相似的氨基酸排列顺序或空间构型，它能够在体内模拟始动抗原的作用。应用Ab2β的这一特性，可有目的地制备Ab2β，将其作为抗原的替代物用于基础和临床医学研究。
基因突变 可使个别 酶活性 增高，其 代谢 产物增多从而可引起 疾病 。例如有一类 痛风 （gout）是由于患者体内的 磷酸核糖焦磷酸合成酶 (phosphoribodsylpyrophosphate synthetase,PRPP-syn)结构 变异 ，酶活性可升高3倍，致使 磷酸核糖焦磷酸 （PRPP）的生成大大加快（图4-24），结果由PRPP分解的终...
除了 生理 条件可引起酶测定值的变化外，还有其它一些非 病理 因素也会引起实验室测定结果的变化。 （一）酶测定方法 酶测定方法大致经过三个历史发展阶段，50年代以前大都使用“固定时间法”，即让酶与 底物 作用一段固定时间，一般为半小时左右，然后停止 酶反应 ，用光电比色测产物生成量或底物消耗量，从而计算出酶 催化 反应的平均速度。再据此按各作者自己定义的“单...
目前的研究指出，用免疫细胞化学检查病 人血 清中的dsDNA抗体为作为 系统性红斑狼疮 的诊断依据之一。佐佐木毅等和徐世玉等发现一些临床症状和血清学检查不典型的 红斑狼疮 病人，在发病早期就出现抗dsDNA抗体，认为这可能有助于早期诊断。 1．用马疫锥虫抗原检测抗dsDNA抗体方法 （1）底物制备：用马疫锥虫感染小鼠2～4天后，取小鼠的外周血，按血液细胞计数...
弥散量（DL）是测定 肺泡 膜功能的一项 生理 指标，即在一定时间内（1min）单位分压差（kPa）条件下，能够通过肺泡膜的气体量。以公式表示如下， 弥散量 = 通过肺泡膜气体量 肺泡中气体分压-肺 毛细血管 血液 中气体分压 临床上多以 一氧化碳 作为测定肺泡膜弥散量的气体。因CO在血中溶解度大于肺泡的溶解度，而且CO与 血红蛋白 结合比氧大210倍，吸入...
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