...特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的分子进行标记,这条链就称为核酸探针。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法是放射性同位素标记。常用的放射性同位素有32P和35S前者能量高,信号强,最常用。放射性同位素标记探针虽然敏感度高,但却存在辐射危害和半衰期限制(32P...
...。 后两种情况属于外部质量控制。 (二)放射免疫分析中造成测量误差的因素 误差包括系统误差和随机误差。系统误差发生在测量过程中由于仪器不准、试剂不纯、标准品不稳定等原因,使测定结果呈倾向性偏大或偏小,这种误差应力求避免。随机误差是测量过程中各种偶然因素造成的,没有固定的倾向性,这类误差是不可避免的,必要时做统计学处理。 造成误差的可能来源有以下几个方面: 1...
...特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的进行标记,这条链就称为核酸 探针 。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。 放射性同位素 标记是最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法。常用的放射性同位素有32P和35S。32P因其能量高,信号强,所以最常用。放射性同位素标记探针虽然敏感度高,但却存在 辐射 危害...
...菌抗原、寄生虫抗原以及一些小分子物质(如环型核苷酸等)和药物(如地高辛、毛 地黄 甙等)的分析,应用范围还在不断扩展。近年来由于小分子半抗原制备抗体的技术有很大的发展,有人预测几乎所有的生物活性物质,只要其含量不低于RIA的探测极限,都可建立适当的RIA法。 4.操作简便RIA所需试剂品种不多,可制成配套试剂盒;加样程序简单一次能分析大量标本,标本用量也少;...
...9月20日,80℃以下风干,按《中华人民共和国药典》规定中药材取样法取样12批;银杏叶注射剂及其中间体为本课题组小试产品。 1.2 供试品的制备:称取干银杏叶50g放人圆底烧瓶中,加10倍量50%乙醇。水浴回流2h,吸出5mL回流液用甲醇定容至10ml容量瓶中,再吸取5mL,过TOYOPAK ODS柱,滤液即为液相样品(取银杏叶注射剂及其中间体适量用甲醇溶解...
上述各种方法制备酶标抗体时,除产生酶标抗体外,还有未标记的抗体蛋白、游离酶、酶二聚体及偶联剂等。这些均可使酶标抗体的敏感性下降,故酶标抗体须经纯化后应用。现简介几种常用的纯化方法。 1.多聚体的分离实验中,不同的试剂形成的多聚体的数量各异,即使同样的实验药物和程序,在不同的时间制备的酶标抗体中,多聚体的数量亦不相同。多聚体较单体含酶量多,与组织的非特异吸附增...
要使ELISA测定得到准确的结果,不论是定性的还是定量的,必须严格按照规定的方法制备试剂和实施测定。主要试剂的制备要点已如前述,其他一般性试剂,如包被缓冲液、洗涤液、标本稀释液、结合物稀释液、底物工作液和酶反应终止液等,配制时不可掉以轻心。缓冲液可于冰箱中短期保存,使用前应观察是否变质。蒸馏水的质量在ELISA中也至关重要,最好使用新鲜重蒸馏的。不合格的蒸馏...
...、 核酸 提取相对容易,加之诊断分子生物学技术的灵敏度与特异性,使临床应用价值提高。特别是病毒致病日益猖獗, 临床诊断 的不断需要,及应用 试剂盒 的不断开发,操作手续的不断简化,外源基因的检验方法在临床不断得到应用。该领域的发展趋势很可能成为诊断分子生物学技术在临床应用的突破口,应用前景广阔。 内源性 基因诊断 目前在遗传性 疾病诊断 方面应用较多,不断向...
(一)试剂制备 用抗甲组溶血性链球菌的抗体,以FITC标记,制成荧光抗体,再用C和G链球菌充分吸收;或用抗I型链球菌M蛋白成分的血清,标记后吸收,都有可靠的特异性。 (二)检查方法 (1)以棉拭子擦拭患者咽部粘膜,取标本。 (2)将拭子浸入1ml肉汤小试管内,37℃培养2~3h。 (3)取出棉拭了作分离培养,常规鉴定。将肉汤液离心3~4min,3000r/m...
...如测定LD的血清存放冰箱中可使辊个亚基解聚,使其活性明显下降,相反放在室温中24小时仍稳定。因此必须了解待测项目存放条件、温度、时间等。一般试剂盒的说明书及参考书内均有介绍请仔细阅读,严格掌握。 (二)分析过程 分析过程的质量控制包括诸多环节,现仅就主要的简述如下。 1.方法的选择和评价:实验室要想把质量放在首位,首先要选用一个可靠的检测方法,即有一定精密度...
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