...现在多以大白鼠胃壁和肾组织血管壁平滑肌的4~6μm冰冻切片和抗原,附贴在干净的盖玻片上,电扇吹干,放入4℃干燥剂中保存,用前可固定于95%(4℃)酒精中1min,或不固定进行间接免疫荧光检测。染色结果可见胃壁平滑肌,粘膜肌层和肌丝,小血管壁...
...脂蛋白受体主要包括乳糜粒受体(CM-R)、极低密度脂蛋白受体(VLDL-R)、低密度脂蛋白受体(LDL-R)、高密度脂蛋白受体(HDL-R)和清道夫受体(scavenger receptor)等。脂蛋白受体的检测与一般受体检测方法的原理及...
...Bottazzzo(1974)用人胰腺,近年有人用兔胰腺的冰冻或石蜡切片抗原,间接免疫荧光法检测糖尿病人血清中有ICAb,发现约在60%~70%的新诊断的胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)病人不论年龄大小,其ICAb均呈阳性。ICAb对胰岛四...
...5min。③PBS洗2次,各1min。④荧光抗体反应1min(同步骤2),放5min 。⑤PBS洗2次,各1min。⑥缓冲甘油封片。荧光显微镜检测。(3)结果:阳性为黄绿色荧光,阳性为红色。微波炉型号不同,应经预实验选定强度和时间。...
...RFLP进行的临床诊断(详第十三章)。应当指出,由于多种遗传标记的定位,使RFLP的应用更加广泛。遗传图对疾病诊断的价值最明显的是当某一基因已被定位于某染色体,但尚未被克隆时,就可依赖于运用一个或多个遗传标记进行连锁分析,利用它和该基因的重组...
...RFLP进行的临床诊断(详第十三章)。应当指出,由于多种遗传标记的定位,使RFLP的应用更加广泛。遗传图对疾病诊断的价值最明显的是当某一基因已被定位于某染色体,但尚未被克隆时,就可依赖于运用一个或多个遗传标记进行连锁分析,利用它和该基因的重组...
...%蔗糖或甘油溶液作密度梯度离心,分带收集不同大小颗粒的胶体金标记蛋白制剂。几种免疫金探针离心所用转速(见表5-6),离心纯化时所用转速见表5-7,胶体金的OD值见表5-8。表5-6 几种免疫金探针离心时所用转速参考表胶体金颗粒直径(nm)...
...分化抗原如表21-1所示。表21-1 T胞表面主要CD抗原及其特异性CD抗原特 异 性CD2E受体、全部T细胞和部分NK细胞CD3成熟T细胞CD4T(辅助/诱导)细胞、Mφ、HIV受体CD8T(杀伤/抑制)细胞、NK细胞的亚型CD25活化T...
...引物虽然与核心DNA区两末端序列互补,但两引物3’端是相互反向的。扩增前先用限制性内切酶酶切样品DNA,然后用DNA连接酶连接成一个环状DNA分子,通过反向PCR扩增引物的上游片段和下游片段;现已制备了酵母人工染色体(YAC)大的线状DNA...
...细胞内碱性磷酸酶含量低或因某些未死亡细胞能自行释放,从而影响法灵敏度和特异性。此外乳酸脱氢酶分子较大,仅当靶细胞膜完全被破坏时才释放,故不能较早地反映效应的功能。(三)荧光法检测原则是用荧光素标记靶细胞,经与效应细胞共温后,离心法上清,用荧光...
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