...以生物素标记抗体作第一抗体，酶标记抗生物素作为第二抗体（图6-3）。操作步骤如下：图6-3 LAB技术（1）切片在含有25～50μg/ml生物素标记抗体（PBS液稀释）中孵育1h，室温。（2）PBS洗2次，每次5min。（3）用20～50...
...（1）新鲜或固定的细胞进行直接法或间接法免疫标记。（2）PBS（pH7.5）冲洗3min×2，加入1mmol/l MgCl2蒸馏水洗洗3min×3，离心沉集细胞。（3）将细胞团置于小纸板上，入液氮冷却的Freon中，取出入冷冻蚀刻仪中进行...
...Taq酶不含3’→5’核酸外切酶活力。误掺入率取决于dNTP浓度。但Taq酶具有DNA依赖的链移位5’→3’核酸外切酶活力。对5’→3’32P标记寡核苷酸单链，或与MB模板杂交时均只有极少的降解力。中等浓度KCl能刺激Taq酶合成活力达50%...
...电磁搅拌。（3）在室温中搅拌2h，避光。（4）把结合物移入直径3cm,高30cm大小的Bio –Gel P-6层析柱（用0.01mol/l pH8.0的PBS平衡过），流速为1.5ml/min。（5）收集先流出的红色结合物，即为标记抗体，...
...在获得特异的目的基因后，可用以下方法大量扩增制备：①用体外DNA重组技术与载体DNA相连，转化至大肠杆菌中进行无性繁殖。以氯化铯超速离心纯化重组质粒DNA，并以合适限制性内切酶消化，经凝胶电泳制备回收特异的目的核酸片段。②聚合酶链式反应（...
...数次。（3）置于HRP标记抗体液（第二抗体）4℃过夜。然后用4℃含蔗糖PBS反复冲洗数次。4℃浸漂过夜。（4）2.5%戊二醛（pH7.4磷酸缓冲液）再固定1h，4℃用含蔗糖PBS反复冲洗去戊醛，每次5min，共洗3次。（5）DAB-H2O2...
...0.27mg/ml蛋白A等量混合，22℃反应6h，混合物4℃保存备用。以上两种PE标记制品，可最后溶于0.01mol/l pH7.4PB(含有0.1mol/l DETA、1mol/L碘乙酰胺、1%BSA 和0.1%NaN3),0～5℃保存。...
...1 试剂1.1 高氯酸。1.2 浓硫酸。1.3 30%过氧化氢。1.40.04mol /L 钼酸铵取钼酸铵5g，加蒸馏水溶解成100ml。1.5 还原剂称取亚硫酸氢钠6g，亚硫酸钠1.2g，1-氨基-2-茶酚磺酸0.1g，加蒸馏水溶解成...
...1 试剂1.1 高氯酸。1.2 浓硫酸。1.3 30%过氧化氢。1.40.04mol /L 钼酸铵取钼酸铵5g，加蒸馏水溶解成100ml。1.5 还原剂称取亚硫酸氢钠6g，亚硫酸钠1.2g，1-氨基-2-茶酚磺酸0.1g，加蒸馏水溶解成...
...核酸是生物体内的高分子化合物，包括DNA和RNA两大类。一、元素组成组成核酸的元素有C、H、O、N、P等，与蛋白质比较，其组成上有两个特点：一是核酸一般不含元素S，二是核酸中P元素的含量较多并且恒定，约占9～10%。因此，核酸定量测定的...
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