DNA分子是4种脱氧核苷酸经3’→5’磷酸二酯健聚合而成，所以了称为多核苷酸（polynucleotide）。DNA的一级结构是指4种核苷酸的连接及其排列顺序。1953年Watson和Cricd提出了DNA分子双螺旋结构模型，其要点是：DNA分子是由2条平行的多核苷酸链围绕同一中心轴构成的右手双螺旋结构（B型DNA）。多种芏酸的方向由核苷酸间的磷酸二酯健的走...
一、DNA变性
（一）基本原理 应用DNA探针缺口翻译（nick translation）方法，通过碱基配对以一条DNA链为模板，将生物素标记的某一种脱氧三磷酸核苷酸如Bio-dUTP渗入有缺口的DNA链。将生物素标记的DNA探针与细胞或组织进行原位杂交。显示方法有二种：一种是用HRP显示，类似免疫电镜技术中采取的包埋前染色法，利用地高辛-过氧化物酶HRP显色法进行光镜水平...
（一）DNA的酶切与连接 （1）酶切反应 同质粒DNA的鉴定，只不过是质粒DNA换为载体DNA。若大量酶切，则成比例增加。 （2）加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀，-20℃2h以上。 （3）15000rpm离心15min，弃上清。 （4）加入75%乙醇洗涤2次，离心弃上清，真空抽干。 （5）加入适量1×TE溶解。如此可得线性...
急性细菌性 前列腺炎 由于其临床表现明显和典型，易做出诊断;慢性前列腺炎综合征的临床特点变异较大，且不确切，许多症状、体征和病理学检查在 慢性细菌性前列腺炎 、 非细菌性前列腺炎 和前列腺痛中经常无法鉴别，放射学和尿道膀胱镜检查，对诊断可能有一些帮助，但也不能肯定诊断。前列腺组织学检查只在一些少见类型的前列腺炎，如 肉芽肿 型前列腺炎才需要。在慢性细菌性前列...
真核rDNA序列的基因片段包含18S，5.8S和28S束，形成一个串联重复集群；NTS、非转录间隔、ETS、外部转录间隔、ITS、内转录间隔1和2，从5'末端编号。 核糖体DNA （Ribosomal DNA ，rDNA）是一种DNA 序列 ，该序列用于 rRNA 编码。 核糖体 是 蛋白质 和rRNA 分子 的组合， 翻译 mRNA分子以产生蛋白质的组件。...
一、质粒DNA的提取及鉴定
虽然一般认为DNA探针敏感度不如cRNA探针，但在病毒的检测等领域中DNA探针仍得到广泛的应用。 在原位杂交细胞化学的操作步骤方面与cRNA探针基本相同，所不同的是：（1）杂交时需先在高温80～95℃短时处理，使DNA探针及细胞内靶DNA变性，解离成单链，迅置于冰上冷却。然后置于37℃～42℃杂交过夜。（2）RNA酶的溶液的冲洗不能减低背景，因此，在操作步骤...
近10年来，现代分子生物学技术越来越广泛地被用于 人类 疾病研究的诸领域，为了解病理状态下基因组DNA的变化积累了新资料。目前认为，人类基因组并非人们想象的那样稳定，诸如基因重排、扩增、缺失，突变和DNA甲基化类型改变等时有发生，这些改变对于基因表达和调控，以及疾病过程的发展与转归等方面均具有重要意义。 医院病理科档案中积存的大量石蜡包埋组织，是一个可靠的分...
目前的研究指出，用免疫细胞化学检查病 人血 清中的dsDNA抗体为作为 系统性红斑狼疮 的诊断依据之一。佐佐木毅等和徐世玉等发现一些临床症状和血清学检查不典型的 红斑狼疮 病人，在发病早期就出现抗dsDNA抗体，认为这可能有助于早期诊断。 1．用马疫锥虫抗原检测抗dsDNA抗体方法 （1）底物制备：用马疫锥虫感染小鼠2～4天后，取小鼠的外周血，按血液细胞计数...
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