(1)基本原理:ABC法是Hsu 等于1981年在HRAB法和LAB法的基础上改良的,其特点是利用抗生物素分别连接生物素标记的第二抗体和生物素标记的酶。与LAB法和BRAB法不同的是第一抗体不为标记物所标记,生物素标记的第二抗体与ABC复合物相连接。复合物是将过氧化酶结合在生物素上、再将生物素—过氧化酶连接物与过量的抗生物素蛋白反应而制备的(图6-1),最后
分子杂交是核酸链间碱基配对规则的一种结合方式,是核酸的重要理化特性。利用分子杂交这一特性来对特定核酸序列进行检测,必须将杂交链中的一条用某种可以检测的分子进行标记,这条链就称为核酸探针。因此,核酸探针的制备是分子杂交技术的关键。最早采用的也是目前最常用的核酸探针标记方法是放射性同位素标记。常用的放射性同位素有32P和35S前者能量高,信号强,最常用。放射性同...
...3年成功的报告了原位杂交及聚合酶链反应结合法,简称为原位杂交PCR(PCr in situ, PCRIS)。在本书二十二章 中曾介绍了PCR技术,它是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的无细胞克隆技术,基本步骤包括高温变性,低温退火适温延伸三个步骤的反复热循环,其效率可使几个拷贝的模板序列甚至一个DNA分子扩增10 7 ~10 9 倍。大大提高了DNA...
在电镜水平应用较为广泛,因该法具有特异性中、灵敏度高、方法简便和背景染色淡等优点。蛋白A的免疫特异性在第五章 已作了介绍,PAg复合物制备方法简便,作为第二抗体,无种属特异性,可以免去不同种属动物要制备不同的特异性免疫球蛋白。PAg 复合物与包埋剂和细胞成分都极少发生非特异性的交互作用,蛋白A和金粒间非共价的结合特性既不影响蛋白A的活性,又能保持高度的稳定性
(一) DNA 探针 DNA探针是最常用的 核酸 探针,指长度在几百 碱基对 以上的双链DNA或 单链DNA 探针。现已获的DNA探针种类很多,有 细菌 、 病毒 、 原虫 、 真菌 、动物和人类 细胞 DNA探针,这类探针多为某一 基因 的全部或部分序列,或某一非编码序列。这些DNA片段须是特异的,如细菌的 毒力 因子 基因探针 和人类ALU探针,这些DN...
...l甲醛/SSC缓冲液(10×SSC中含0.15mol/l甲醛)使RNA变性。然后取5~8μl点样于处理好的滤膜上,烘干。 培养细胞,标本处理技术可以简化,不用提取和纯化RNA。方法是用含0.5%Nonidet P40的低渗缓冲液对多种动物细胞作简单处理,离心去掉细胞核和细胞碎片,就得到基本不带DNA而富含RNA的细胞质提取物,这一粗RNA在高盐下用甲醛变性,...
肿瘤 组织合成 DNA 和 RNA 的 聚合酶 活性均较正常组织高,与此相应, 核酸 分解过程明显降低,故DNA和RNA的含量在 恶性肿瘤 细胞 均明显增高。DNA与细胞的分裂和繁殖有关,RNA与细胞的 蛋白质合成 及生长有关。因此,核酸增多是肿瘤迅速生长的物质基础。
注射用抗肿瘤免疫核糖核酸 (Immunoglobulin Ribonucleic Acid of Anti Cancer for Injection),本系列产品具有无 抗药性 ,无毒付反应,能增强机体免疫功能、激活体内 免疫细胞 、杀伤 癌细胞 ,产生特异性抗癌 免疫 效应,用于治疗与所用免疫癌组织相对应的各类 癌症 。尤对术后患者或与 放疗 、 化疗 结...
...是一种已知特异性的分子,它带有合适的标记物供反应后检测。探针和靶的相互反应如抗原-抗体、血凝素-碳水化合物、亲合素-生物素、受体和配体,以及核酸与其互补核酸间的杂交等反应均属此类。用核酸探针与待检标本中核酸杂交,形成杂交体,再用呈色反应显示。此方法用于疾病的诊断,称为分子杂交基因诊断。此法开始用于遗传性疾病的诊断如血红蛋白病的诊断、先天性遗传病的产前诊断。近...
《 儿童溺水干预技术指南 》是 中国卫生部 疾病预防控制局组织编写的伤害干预系列技术指南之一。于2011年9月6日发布。同时发布的指南还有《 儿童道路交通伤害干预技术指南 》《 儿童跌倒干预技术指南 》《 老年人跌倒干预技术指南 》等。 《儿童溺水干预技术指南》全文word文档下载
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