如前所述，由于核酸探针的种类和标记物的不同，在具体应用的技术方法上也各有差异，但其基本方法和应用原则大致相同。大致可分为：①杂交前准备，包括固定、取材、玻片和组织的处理，如何增强核酸探针的穿透性、减低背景染色等；②杂交；③杂交后处理；④显示（visual－ization）：包括放射性自显影和非放射性标记的显色。 （一）固定 原位杂交组织化学技术（In Sit...
核酸是生命的最基本物质之一，广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内、生物体内，常与蛋白质结合形成核蛋白。 众所周知，核酸是生命的最基本物质之一，广泛存在于所有动物、植物细胞、微生物内、生物体内，常与蛋白质结合形成核蛋白。 美国科学家经过20多年的研究工作得出结论：细胞的健康有赖于核酸的健康，如果核酸充足、健康，就能有效地抵抗衰老，延长人的寿命。一些人之所以提...
...上述配方所列只是不可缺少的基本成份。 配制好的杂交液不宜反复冻融，否则易产生硫酸葡聚糖沉淀现象。使用前最好加热至50℃，使其充分溶解后再加入探针分子。至于探针的浓度视实验目的、探针类型及标记方法而异。通常RNA探针分子浓度为0.5～2μg/ml，DNA探针浓度为1μg/ml,此外，如使用 35 S标记的探针，还需加入终浓度为100mmol/L的二硫苏糖醇（D...
核酸 是由 核苷酸 聚合而成的 高分子化合物 ，是所有 生物 遗传信息 的 携带者 。根据核苷酸 分子 中 戊糖 的类型，将核酸分为 脱氧核糖核酸 ( DNA )和 核糖核酸 ( RNA )两大类。 核苷酸由 磷酸基 、戊糖和 含氮碱基 组成， 碱基 包括嘌呤和 嘧啶 两大类。DNA一般含A、C、G、T四种碱基，RNA含A、C、G、U四种碱基。 四种核苷酸按...
...的基本技术是人工进行基因的剪切、拼接、组合。基因是一段具有一定功能的DNA分子，要把不同基因的DNA线形分子片段准确地切出来，需要各种限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）；要把不同片段连接起来，需要DNA连接酶（ligase）；要结合基因或其中的一个片段，需要DNA酶（DNa polymerase）等。因此，酶是DNA重组技术...
...em Cytochem, 1986July;34(7):923～926 12. 正向华，蔡文琴，等.用光敏生物素反意生长抑素(SS)cRNA探针显示组织切片中ss mRNA。解剖学杂志，1992，15（4）：312～313 13.正向华,张俐.应用反意生长抑素cRNA探针原位杂交显示大鼠下丘脑生长抑素mRNA.解剖学杂志,1990,13(4):307 14....
美国科研人员发现，一种灵敏度较高的核酸检测方法，能够检测出刚染上人类免疫缺陷病毒(HIV)的患者，而现有的标准检测还无法做到这点。 加州大学圣地亚哥分校的莫里斯医生等科研人员对3100多人进行了这项研究，安排他们接受标准的HIV病毒检测以及核酸检测(Nucleic acid test)，即检测HIV病毒的基因物质。 研究结果发现，有79人感染该病毒；其中有1...
核酸结构的基本单位是核苷酸（nucleicacid），每个核苷酸由1个磷酸、1个五碳糖和1个碱基3部分组成。核酸有两类：一类是脱氧核糖核酸（DNA），DNA中的脱氧核糖核苷酸主要由4种碱基构成，即腺嘌呤(adenine,A)、鸟嘌呤（guanine,G）、胞嘧啶（cytosine,C）和胸腺嘧啶（thymine,T），此外，还有脱氧核糖（deoxyribos...
通过大肠埃希菌繁殖而增殖重组质粒，也是扩增核酸的手段。但在试管中有效扩增DNA的方法，是在90年代才开展起来的多聚酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）新技术。由于PCR灵敏度高、特异性好、操作方便，在我国发展很快。目前，PCR技术结合分子生物学实验技术（如逆转录反应杂交技术等）开发了许多PCR新技术（reverse tran...
核酸存在于多种细胞，如病毒、细菌、寄生虫、动植物细胞；多种标本中，如血液、组织、唾液、尿液等其它来源的标本。因此分离方法复杂而多样。又因各种DNA、RNA的丰度差异，各种分析方法对核酸的纯度与量的要求有差异，因此在实验前应对采用的方法有所了解和选择。总的说来核酸的分离与纯化是在溶解细胞的基础上，利用苯酚等有机溶剂抽提（核酸溶于缓冲液，即水相），分离，纯化；乙...
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