RNA聚合酶（RNapolymerase）的作用是转录RNA。有的RNA聚合酶有比较复杂的亚基结构。如大肠杆菌RNA聚合酶有四条多肽链，另有一个促进新RNA分子合成的σ因子，因此它的组成的是α2ββσ。这种结构称为全酶（holoenzyme）,除去了σ因子的酶称为核心酶。噬菌体RNA聚合酶则没有亚基。 真核生物的RNA聚合酶分三类。RNA聚合酶Ⅰ存在于核仁中...
...附素等都与其致病相关。诊断Hp感染已从传统的细菌学，免疫学手段发展到分子生物学方法，尤其是通过分析Hp核酸，已清楚Hp的部分核苷酸序列，这为聚合酶链反应（polymerase chainreaction，PCR）用于Hp研究创造了条件。本文就近年有关PCR在Hp研究中的应用作一综述。 1 PCR原理 PCR是近年发展起来的一种体外扩增特DNA片段的技术，有关...
... polymerase）的作用是将1个脱氧三磷酸核苷酸加到引物（primer）的3’-OH上，释放出一个焦磷酸分子（ppi），如下式表示。 聚合酶主要有以下几种： 1．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅰ大肠杆菌DNA聚合酶（E.ColiDNA polymerase）主要有3种作用：①5’→3’的聚合作用。但不是复制染色体而是修补DNA，填补DNA上的空隙或是切除RNA引...
近年来，基因分析和基因工程技术有了革命性的突破，这主要归功于聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）的发展和应用。应用PCR技术可以使特定的基因或DNA片段在短短的2－3小时内体外扩增数十万至百万倍。扩增的片段可以直接通过电泳观察，也可用于进一步的分析。这样，少量的单拷贝基因不需通过同位素提高其敏感性来观察，而通过扩增至百万...
1988年Higuchi等报道，可以从人的单根毛发的毛囊细胞中抽提DNA，并结合运用DNA聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）技术，分析了单根毛发细胞中抽提的线粒体DNA的D环区（D-loopregion）的“DNA”指纹图”。 PCR技术由Mullis等首创（详见第二十二章 ）。它又称为DNA体外扩增技术，是用DNA聚...
如果已经知道目的基因的序列，就能很方便地用PCR聚合酶链式反应，polymerase chain reaction，从基因组DNA或cDNA中获得目的基因，可不必要经过复杂的DNA文库构建过程。PCR是70年代中期创立的技术，其基本原理如图20-10所示。 图20-10 PCR基本原理示意图 PCR反应系统包括含有目的基因或序列的DNA模板，对热稳定的DNA...
聚合酶链反应（PCR）或称体外基因倍增技术，它利用一对位于待扩增的DNA序列两端的取向相对的DNA引物，在DNA聚合酶的介导下，经过多次变性，退火和延伸过程的重复性循环，大量合成靶DNA序列。在标记dNTP存在时，经PCR反应产生的靶DNA片段均参入了标记物，用此法标记的探针标记率高达97.4%。此法重复性好，简便、快速、特异、不要求模板DNA的纯度，可以大...
...醇、170mg/l BSA、6.7μmol/l EDTA和40μl/ml二甲亚砜。将反应管置于95℃水浴变性5min取出，加入Taq DNA聚合酶0.5～2u,在旋涡混合器上混匀简单离心一下，加入35μl石蜡油。放入65℃水浴2min，取出，立即进入PCR循环：91℃变性30s,51 。 C退火1min，68℃延伸2min。重复上述过程15次。最后将反应管置...
1990年Hoshina等首行应用聚合酶链反应（PCR）成功检出胃粘膜活检标本内的Hp。我院从今年1995的1月份开始，在短短3个月中对7 ■［此处缺少一些内容］■ 『笥Σ?0μl直接点样于含溴乙锭琼脂糖胶板孔中，电泳80V，10min～25min停止电泳，于紫外检测仪观看结果。 表1 两种方法检测结果比较 n PCR 尿素酶试验 35 ＋ ＋ 17 ＋ ...
1990年Hoshina等首行应用聚合酶链反应（PCR）成功检出胃粘膜活检标本内的Hp。我院从今年1995的1月份开始，在短短3个月中对7 ■［此处缺少一些内容］■ 『笥Σ???0μl直接点样于含溴乙锭琼脂糖胶板孔中，电泳80V，10min～25min停止电泳，于紫外检测仪观看结果。 表1 两种方法检测结果比较 n PCR 尿素酶试验 35 ＋ ＋ 17 ＋...
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