...不对称PCR的基本原理是采用不等量的一对引物产生大量的单链DNA（ss-DNA）。这两种引物分别称为限制性引物与非限制性引物；其最佳比例一般为1：50～1：100，关键是限制引物的绝对量。限制性引物太多太少，均不利于制备ss-DNA。也...
...HSV-1和HSV-2的优点。 四、基因诊断 （一）用PCR分型检测单纯疱疹病毒 PCR是一种敏感性高，特异性强的快速检测方法，标本中含有1fg HSV-DNA就可以检出，其在HSV感染的诊断研究中发展较快，且分型检测HSV是发展的趋势。 1、...
...制备成的酶标抗体或抗原性质稳定，继续保留着它的活性部分和催化能力。最好在受检标本中不存在与标记酶相同的酶。另外它的相应底物应易于制备和保存，价格低廉，有色产物易于测定，光吸收高。ELISA中最常用的酶为辣根过氧化酶（HRP）和从牛肠粘膜或...
...淋球菌的方法，虽然比培养方法在灵敏度，特异性和方便性上有了很大的提高，但其仍有一定的局限性，如多数情况下需要标本的淋球菌浓度很高，PCR技术和连接酶链反应的出现进一步提高了检测淋球菌的灵敏性，它具有快速、灵敏、特异、简便的优点，可以直接检测临床...
...蒸馏水稀释，保存于4℃冰箱。2．标本处理：目的是为了暴露梅毒螺旋体的DNA，消除标本对PCR的抑制物。采用下列处理方法。①煮沸法：取10或20μl血清或CSF放入0.5ml微量离心管中，水浴煮10min后在冰浴中冷却，13000g离心10s，上...
...标本的制备方法 第三节 免疫酶细胞化学技术 一、基本原理 二、电镜标本制备方法 1．单层细胞培养物免疫酶染色法 2．组织切片酶标记抗体染色法 3．PAP包埋前染色法（Pickel 等，1975） 4．PAP包埋后染色法（Ordronneau...
...的结合 四、电镜标本的制备方法 第三节 免疫酶细胞化学技术 一、基本原理 二、电镜标本制备方法 ◦ 1．单层细胞培养物免疫酶染色法 ◦ 2．组织切片酶标记抗体染色法 ◦ 3．PAP包埋前染色法（Pickel 等，1975） ◦ 4．PAP...
...敏感性为100％，特异性为92．4％。与细胞培养法比较，其符合率为96.7％。DIBA适用于大批量标本的检测，但结果需3天。 6．核酸探针 随着分子生物学技术的发展，DNA杂交技术已进入衣原体检测领域。以82S标记7Md质粒制备的探针，检出...
...近年来发展的PCR方法具有特异、敏感、简便、快速等优点，为HPV检测开辟了新途径。（一）标本的采集及处理1．标本的采集和预处理：用刮板或生理盐水浸润的棉棒从阴道和宫颈外口取分泌物和细胞。在作细胞学检查的同时，将标本放入5ml含有0.05%硫柳汞...
...一、PCR操作范例在一个典型的PCR反应体系中需加入：适宜的缓冲液、微量的模板DNA、4×dNTPs、耐热性多聚酶、Mg2+和两个合成的DNA引物。模板DNa 94℃变性1min，引物与模板40～60℃退火1min，72℃延伸2min。在...
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