...诊断衣原体感染单靠临床表现是不够的,必需经过一定的实验室检查,才能够确诊。常用的检查方法是衣原体培养、直接荧光抗体检测、酶标免疫反应和DNA探针与聚合酶链式反应(PCR)。 (1)衣原体培养 由于沙眼衣原体是在细胞内寄生,所以它只能在组织...
...PCR技术的出现给克隆的筛选增加了一个新手段。如果已知目的序列的长度和两端的序列,则可以设计合成一对引物,以转化细胞所得的DNA为模板进行扩增,若能得到预期长度的PCR产物,则该转化细胞就可能含有目的的序列。...
...细胞内寄生,所以它只能在组织中培养。衣原体的培养取材一般应在的尿道深入0.5cm以上 3、酶标免疫反应,这是目前应用最广的检测方法。该法的优点是快速、方便、廉价和检测批量化。 4、PCR,PCR将标本数目有限的目标DNA或RNA序列成百万倍...
...PCR温度循环至关重要,PCR扩增仪各参数必须准确。自Perkin –Elmer Cetus公司第一台PCR扩增仪问世以来,现已有几十家不同的厂家在国内外生产和销售PCR扩增仪。在短短的几年间,扩增仪经过几代的发展,不断采用新技术,并且...
...PCR扩增DNA的原理是:先将含有所需扩增分析序列的靶DNA双链经热变性处理解开为两个寡聚核苷酸单链,然后加入一对根据已知DNA序列由人工合成的与所扩增的DNA两端邻近序列互补的寡聚核苷酸片段作为引物,即左右引物。此引物范围就在包括所欲...
...诊断衣原体感染单靠临床表现是不够的,必需经过一定的实验室检查,才能够确诊。常用的检查方法是衣原体培养、直接荧光抗体检测、酶标免疫反应和DNA探针与聚合酶链式反应(PCR)。 (1)衣原体培养 由于沙眼衣原体是在细胞内寄生,所以它只能在组织...
...人疱疹病毒——一种可在接受器官移植的儿科患者中引起严重后果的病毒——可通过聚合酶链反应(PCR)进行监测。 接受器官移植的儿童往往会由于疱疹病毒的存在而预后极差甚至死亡。德克萨斯大学的R. H. Scheuermann及其同事研究了PCR...
...PCR是体外酶促合成特异DNA片段的新方法,主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成:即在高温(95℃)下,待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板;而后在低温(37~55℃)情况下,两条人工合成的寡核苷酸引物...
...)—PCR。它的原理是采用随机选出的单一核苷酸链为引物以靶DNA模板在多个部位引导扩增DNA。经过RADP技术处理的结果可显示出不同Hp株的特异性。因此亦有人把此方法用于Hp的流行病学研究上。随着分子生物学技术的不断发展,PCR技术的应用在...
...不同外显子区域不同长度的部分缺失类型。二、PCR法和核苷酸序列分析法采用PCR法将包括点突变的受体基因片段扩增,再经核苷酸序列分析即可发现点突变位点。影响酶切位点的点突变可经PCR扩增、特定的限制性酶切、电泳,检测出异常片段。三、寡核苷酸探针...
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