...简称为原位杂交PCR(PCr in situ, PCRIS)。在本书二十二章 中曾介绍了PCR技术,它是一种对特定的DNA片段在体外进行快速扩增的无细胞克隆技术,基本步骤包括高温变性,低温退火适温延伸三个步骤的反复热循环,其效率可使几个拷贝...
...免疫学方法,所需时间也已达到临床要求,这对于难于培养的病毒(乙肝),细菌(如结核、厌氧菌)和原虫(如梅毒螺旋体)等来说尤为适用。3.癌基因的检测和诊断 虽然对癌基因的研究大部分还属于基础阶段,但癌变是由基因变异所导致的这一基本事实已无庸置疑...
...TCRVγI-Jγ重排基因也可应用于微小残留病的监测和早期预测复发的研究。 应用多重PCR技术可以一次PCR循环同时扩增IgH和TCR基因重排,对基因重排的检出率高于单独检测单个基因重排;而与分别扩增的方法比较,多重PCR技术可减少加样次数...
...水浴5min。反应完成,加入酵母tRNA10μg。分别测定参入和游离放射性计数,参入率为97.4%。标记DNA探针经醋酸钠酒精沉淀回收。将沉淀溶于10mmol/l Tris—HCl 、EDTA(pH8.0)100μl。用PCR方法标记的...
...PCR技术的出现给克隆的筛选增加了一个新手段。如果已知目的序列的长度和两端的序列,则可以设计合成一对引物,以转化细胞所得的DNA为模板进行扩增,若能得到预期长度的PCR产物,则该转化细胞就可能含有目的的序列。...
...结核分枝杆菌在体外培养周期长,阳性检出率不高,因此对临床的早期诊断和确定药物治疗都带来一定的困难,应用聚合酶链反应(PCR)技术检测结核分枝杆菌,能大大提供结核分枝杆菌的检出率和检出特异性,有利于临床即使治疗。标本采自患者的痰、支气管...
...PCR是体外酶促合成特异DNA片段的新方法,主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成:即在高温(95℃)下,待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板;而后在低温(37~55℃)情况下,两条人工合成的寡核苷酸引物...
...结核分枝杆菌在体外培养周期长,阳性检出率不高,因此对临床的早期诊断和确定药物治疗都带来一定的困难,应用聚合酶链反应(PCR)技术检测结核分枝杆菌,能大大提供结核分枝杆菌的检出率和检出特异性,有利于临床即使治疗。标本采自患者的痰、支气管...
...标记和检测 三、核酸分子杂交方法 第三节 基因扩增技术(PCR) 一、PCR的基本原理和基本程序 二、PCR的特点 三、PCR方法 四、PCR反应的基本条件及其对PCR的影响 五、PCR标本的制备 六、PCR实验中常见问题对策 七、PCR扩增...
...的种类 ◦ 二、核酸探针的标记和检测 ◦ 三、核酸分子杂交方法 第三节 基因扩增技术(PCR) ◦ 一、PCR的基本原理和基本程序 ◦ 二、PCR的特点 ◦ 三、PCR方法 ◦ 四、PCR反应的基本条件及其对PCR的影响 ◦ 五、PCR标本...
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