(一)特异性高:首次报导的PCR所用的DNA聚合酶是大肠杆菌的DNAPolymeraseI的Klenow大片段,其酶活性在90℃会变性失活,需每次PCR循环都要重新加入Klenow大片段,同时引物是在37℃延伸(聚合)易产生模板—引物之间的碱基错配、致特异性较差,1988年Saiki等从 温泉水 中分离到的水生嗜热杆菌中提取的热稳定的Taq DNA聚合酶,在...
PCR是体外酶促合成特异DNA片段的新方法,主要由高温变性、低温退火和适温延伸三个步骤反复的热循环构成:即在高温(95℃)下,待扩增的靶DNA双链受热变性成为两条单链DNA模板;而后在低温(37~55℃)情况下,两条人工合成的寡核苷酸引物与互补的单链DNA模板结合,形成部分双链;在Taq酶的最适温度(72℃)下,以引物3’端为合成的起点,以单核苷酸为原料,沿...
...rtScan检测仪对早期乳腺肿瘤小到2 mm的都可以检查出,并能判断是否为恶性肿瘤。”这是记者在清华大学第二附属医院体检中心见到操作这台新式仪器的工作人员介绍的。 该仪器的检测原理是通过红外线检测肿瘤周围新生血管的血流量和代谢率。众所周知,恶性肿瘤在开始生长后不久即分泌多种细胞因子,促进肿瘤周围血管的增生,由于恶性肿瘤的生长速度快,其代谢率也高。Comfor...
实验仪器 分类 分类“实验仪器”的页面 此分类包含下列5个页面,共有5个页面。 封 封闭电炉 微 微型离心机 旋 旋涡混合器 气 气浴恒温振荡器 电 电动搅拌器
化学仪器 分类 分类“化学仪器”的页面 此分类包含下列9个页面,共有9个页面。 光 光密度计 洗 洗耳球 滴 滴管 漏 漏斗 移 移液管 药 药匙 试 试管 试管架 酒 酒精灯
一、PCR操作范例
PCR扩增DNA片段只是一个重要手段。扩增片段的检测和分析才是目的,根据研究对象和目的的不同而采用不同的分析法。琼脂糖凝胶电泳可帮助判断扩增产物的大小,有助于扩增产物的鉴定,点杂交除可鉴定扩增产物外,还有助于产物的分型;Southern杂交分析可从非特异扩增产物中鉴定出特异产物的大小,增加检测的特异性与敏感性,最近发展的一系列产物分析法(PCR-ELISA,...
仪器设备在使用过程中,由于仪器本身(如寿命、易损件)或人为(如违反电压、温度、湿度)等因素,常会发生故障或损坏而被停止使用,必须及时进行维修。仪器设备在使用过程中,由于物体的运动,必然全产生技术情况的不断变化,因此要经常做好仪器设备的保养与维修,以改善其技术状况。 (一)仪器设备的保养与维修管理 1.日常保养一般实行三级保养制: (1)日常保养(或称例行保养...
器械本身不准确,试剂不符合规格,或试验条件不稳定等都可引起系统误差。例如测量血压容易产生偏倚,因涉及仪器、测量与标准等。如血红蛋白计未标化,亦可引起偏倚。 防止这种偏倚的产生主要在于使用前对仪器进行标定,试验、检验方法应有详细规定并要求严格的遵循。
pcr技术是近年来创建的研究核酸分子生物学的新技术,它能在短时间内将极微量的遗传物质——dna扩增放大几百甚至几千万倍,具有快速、灵敏、高效和特异的特点。近年来被广泛应用于遗传病诊断、病原体检查、癌基因探查等领域。 由于引起前列腺的病原体较多,且大多难以培养,故检出率较低,而pcr检查具有高度的灵敏性和特异性,所以对的病原体检出具有重要的实践作用。尤其对淋球...
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