...FITC荧光素或HRP标记的抗人Igg 抗体处理。如果病人血清中存在有抗肾小球基底膜抗体,即可与切片上的肾小球基底膜相结合,进一步与荧光标记抗人IgG抗体相反应,而显示沿肾小球毛细血管壁呈连续线形之荧光分布(酶标抗体亦显示同样之连续线形分布)...
...取1g RB200及PCL52g放在乳钵中研磨5min(在通风橱中)。然后加入10ml无水丙酮,放置5min,不断搅拌。过滤,用滤液进行标记抗体。剩余部分吸附在滤纸上,4℃干燥保存。取抗体(20mg/ml)每毫升加入生理盐水和0.5mol...
...时,应想办法改进标本的处理的抗原的保存,提高抗体的穿透力,再重新染色。但有时组织本身抗原含量较少或标本难得(如手术材料),可尝试下述方法以提高染色强度,确保染色成功。1.重复显色一般认为,对ALP标记抗体,延长显色时间其反应可增强。但在同一...
...上述各种方法制备酶标抗体时,除产生酶标抗体外,还有未标记的抗体蛋白、游离酶、酶二聚体及偶联剂等。这些均可使酶标抗体的敏感性下降,故酶标抗体须经纯化后应用。现简介几种常用的纯化方法。1.多聚体的分离实验中,不同的试剂形成的多聚体的数量各异,...
...,常伴抗RNP抗体,有补体减少及肾受累抗RNP抗体 抗U1-snRNP抗体抗MO抗体各种自身免疫病均可出现,单独高效价见于混合结缔组织病(MCTD)。抗SS-B抗体抗La抗体干燥综合征的标记抗体(27%) 抗Ha抗体SLE 5%,同时抗...
...金属类标记物的免疫标记法同切片免疫染色,即将标记物与抗体相结合,通过直接或间接法显示抗原部位。胶体金可与蛋白A相结合后与IgG分子中的Fc 段相结合。哪与卵白素(a-vidin)相结合可与结合抗体的生物素(biotin)反应。免疫金银...
...免疫技术是利用抗原抗体反应进行的检测方法,即应用制备好的特异性抗原或抗体作为试剂,以检测标本中的相应抗体或抗原。它的特点是具有高度的特异性和敏感性。如将试剂抗原或试剂抗体用可以微量检测的标记物(例如放射性核素、荧光素、酶等)进行标记,则在...
...对照试验、吸收试验和抑制试验等方法检验抗体的特异性和敏感性外,可采用伊文氏蓝作对比染色。伊文氏蓝肉眼下是蓝色,在荧光镜下是红色,混合染色后能衬托FITC的绿色荧光,同时抑制非特异性荧光,不影响抗原抗体结合。如果特异性染色后再加伊文氏蓝,比较...
...RIA或RRA标记试剂。方法的原理是:作一条常规的RIA(或RRA)标准曲线,另作一条不加非标记标准品,只加抗体和不同量标记试剂的自身取代曲线。两者用同一种抗体,且抗体用量完全相同。若反应平衡后测定结合部分的放射性,掏算成所加总放射性(注意:...
...,风干待染。2.荧光素标记抗体 异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocynate, FITC)标记抗体的具体步骤详见第三章 。在标记络丹明B200(lissamine rhodamin B200,RB200)时应注意:(1...
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