...的无关DNA(常为鲑精DNA或鲱精DNA)可在予杂交及杂交前加入。此外,有许多物质如肝素、多聚腺甘酸、醋酸钠等多种成份,可根据需要加入杂交液中,上述配方所列只是不可缺少的基本成份。配制好的杂交液不宜反复冻融,否则易产生硫酸葡聚糖沉淀现象。...
...DNA暴露、变性和固定,再按常规方法进行杂交与检测。有人曾用此法从105个培养细胞中检测到少至5pg 的Epstein– Barr病毒DNA。完整细胞斑点印迹法可以用于筛选大量标本,因为它是使细胞直接在膜上溶解,所以DNA含量甚至比常用的...
...变性。与A-T碱基配对比较,DNA双螺旋内的G-C配对更为牢固。在相同条件下,DNA内G-C配对含量高,其Tm值也高。假定在一个双链DNA分子内某些片段含有较多G-C碱基对,根据它们局部Tm值差,用电子显微镜就可以观察和测量到这些片段,如在...
...由于DNA提取方法的改善和DNA质量的提高,几乎所有基因分析的技术均可用于石蜡包埋组织,但目前分子病理学研究的常用方法是点杂交、Southern印迹杂交和多聚酶链反应(PCR)。1.点杂交鉴于包埋组织DNA有一定程度的降解,因而点杂交被...
...,再变性,印迹到硝酸纤维(Nc)滤膜上,用探针进行杂交,检测DNA的方法。自显影或显色用于DNA分析。以32P标记放射性探针为例,放射自显影观察结果。(图18-6)。图18-6 Southernblot体系前述分离、纯化的DNA样品5-10...
...特别重要。室温下DNA双股螺旋链表现为两条由氢键连接在互补多聚核苷酸;加热到65℃时,氢键开始断裂;约90℃时,产生两条单链分子。在此变性状态下,甲醛与酸反应很快,通过羟甲基化作用可抑制DNA冷却后的再复性。最近,Koshiba等发现...
...应用领域逐渐扩大并在两个主要进行了技术法的改进。一方面是应用一系列放大手段增强检测的灵敏度(详见二十二章 ),另一方面是提高其分辨率,即向电镜水平发展。Jacob(1971)首先用3H标记的核酸RNA探针与DNA杂交并在电镜水平显示获得成功,...
...影响,为人类利用这些调控路径造福于健康长寿事业做出贡献。人类染色体DNA双螺旋结构中包含了大约10万个基因,迄今为止,只有不到30种基因被克隆。近年来,基因克隆的新技术、新方法不断涌现,大大加快了基因克隆的步伐。衰老与抗衰老领域完全可以利用...
...影响,为人类利用这些调控路径造福于健康长寿事业做出贡献。人类染色体DNA双螺旋结构中包含了大约10万个基因,迄今为止,只有不到30种基因被克隆。近年来,基因克隆的新技术、新方法不断涌现,大大加快了基因克隆的步伐。衰老与抗衰老领域完全可以利用...
...杂交带,基因的缺失或突变则可能导致带的缺失或位置改变。分子杂交是基因探测的基础,除了用印迹杂交外,还有斑点杂交法。即将DNA样品变性后直接点在硝酸纤维滤膜上,再与探针杂交,或者将细胞或病毒点在膜上,菌落或菌斑原位地吸附在膜上,经过变性处理,...
所有搜索结果仅供参考,如需解决具体问题请咨询相关领域专业人士。