法国bertucci等的研究发现?dna芯片技术能为科研人员提供结(crc)新的诊断指标、预后指标和分类方法,有利于促进癌变机制的研究和提供新的治疗靶点。(oncogene2004?23?1377) 结 直肠癌 是西方国家最常见的致死性肿瘤之一。目前基于临床组织参数的预后判断模式不够准确,不能很好地反映患者个体的遗传背景。dna芯片技术一次可检测数千基因的表...
(一)概述 基因诊断是以核酸分子杂交技术为基础,在核酸水平检测 人类 遗传性疾病的基因缺陷和一些 传染病 病原体的方法。其基本过程是:制备DNA探针,标记探针,检测样本。开展这项工作的关键是要得到高灵敏度、高特异性的探针。以往人们是用放射性同位素来标记探针DNA。近年来,非同位素标记方法发展很快,已有取代同位素标记法的趋势。地高辛配基随机标记DNA探针法,是...
(一) DNA 探针 DNA探针是最常用的 核酸 探针,指长度在几百 碱基对 以上的双链DNA或 单链DNA 探针。现已获的DNA探针种类很多,有 细菌 、 病毒 、 原虫 、 真菌 、动物和人类 细胞 DNA探针,这类探针多为某一 基因 的全部或部分序列,或某一非编码序列。这些DNA片段须是特异的,如细菌的 毒力 因子 基因探针 和人类ALU探针,这些DN...
聚合酶链反应(PCR)或称体外基因倍增技术,它利用一对位于待扩增的DNA序列两端的取向相对的DNA引物,在DNA聚合酶的介导下,经过多次变性,退火和延伸过程的重复性循环,大量合成靶DNA序列。在标记dNTP存在时,经PCR反应产生的靶DNA片段均参入了标记物,用此法标记的探针标记率高达97.4%。此法重复性好,简便、快速、特异、不要求模板DNA的纯度,可以大...
在0.5ml离心管内进行,反应总体积为50μl,内含模板DNA350ng,DNA引物各50pmol/L,dGTP、dCTP和dTTP各200μmol/L,[α- 32 P]dATp 1.1×10 6 Bq,反应缓冲液为67mmol/l Tris—HCl pH8.8含2.5mmol/l MgCl 2 、6.7mmol/L(NH 4 ) 2 SO 4 、10mm...
取HBV质粒DNA0.5μg,DNase I(SABC)2pg, 10×NBTμl,三蒸水补足体积至10μl,37℃,15min;加5mmol/l dATP dGTP dCTP Bio –11- dUTP各2μl,10×NBt 4μl,三蒸水补足体积至10μl,37℃,15min;三蒸水补足体积至49μl,DNA聚合酶i 5u,混匀,14℃过夜,加0.5mm...
基因探针 基因探针,即 核酸 探针 ,是一段带有检测标记,且顺序已知的,与目的 基因 互补的核酸序列(DNA或RNA)。基因探针通过 分子杂交 与目的基因结合,产生杂交信号,能从浩翰的 基因组 中把目的基因显示出来。根据杂交原理,作为探针的核酸序列至少必须具备以下两个条件:①应是 单链 ,若为双链,必须先行变性处理。②应带有容易被检测的标记。它可以包括整个基...
DNA, 即 脱氧核糖核酸 (Deoxyribonucleic acid)是一种分子,核酸的一类,因分子中含有脱氧核糖而得名。DNA是 染色体 的主要化学成分。DNA可组成 遗传 指令,以引导生物发育与生命机能运作。主要功能是长期性的资讯储存,可比喻为生物发育和运作的“蓝图”。带有遗传讯息的DNA片段称为 基因 ,其他的DNA序列,有些直接以自身构造发挥作用...
DNA, 即 脱氧核糖核酸 (Deoxyribonucleic acid)是一种分子,核酸的一类,因分子中含有脱氧核糖而得名。DNA是 染色体 的主要化学成分。DNA可组成 遗传 指令,以引导生物发育与生命机能运作。主要功能是长期性的资讯储存,可比喻为生物发育和运作的“蓝图”。带有遗传讯息的DNA片段称为 基因 ,其他的DNA序列,有些直接以自身构造发挥作用...
DNA, 即 脱氧核糖核酸 (Deoxyribonucleic acid)是一种分子,核酸的一类,因分子中含有脱氧核糖而得名。DNA是 染色体 的主要化学成分。DNA可组成 遗传 指令,以引导生物发育与生命机能运作。主要功能是长期性的资讯储存,可比喻为生物发育和运作的“蓝图”。带有遗传讯息的DNA片段称为 基因 ,其他的DNA序列,有些直接以自身构造发挥作用...
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