...RNA的多聚酶链式反应（RT-PCR）是以RNA为模板，联合逆转录反应（reverse transcrip－tion, RT）与PCR，可用于检测单个细胞或少数细胞中少于10个拷贝的特异DNA，为RNA病毒检测提供了方便；并为获得与扩增...
...复制的终止阶段。在DNA复制的整个过程中需要30多种酶及蛋白质分子参加，我们将在DNA复制的各个阶段中着重介绍它们的作用。二、DNA复制的起始阶段：(一)DNA复制的起始点很多实验都证明：复制是从DNA分子上的特定部位开始的，这一部位叫做...
...如果目的序列两端有与载体上相同的限制性核酸内切酶位点，则同一限制酶切开产生的粘末端，在降低温度退火时，能重新互补结合，在DNA连接酶催化下，目的序列就与载体DNA链相连接（见图20-5）。图20-5 同一限制酶切割DNA粘性末端的连接不同...
...上述各种方法制备酶标抗体时，除产生酶标抗体外，还有未标记的抗体蛋白、游离酶、酶二聚体及偶联剂等。这些均可使酶标抗体的敏感性下降，故酶标抗体须经纯化后应用。现简介几种常用的纯化方法。1．多聚体的分离实验中，不同的试剂形成的多聚体的数量各异，...
...基因工程的基本技术是人工进行基因的剪切、拼接、组合。基因是一段具有一定功能的DNA分子，要把不同基因的DNA线形分子片段准确地切出来，需要各种限制性核酸内切酶（restriction endonuclease）；要把不同片段连接起来，需要...
...不同的修复反应。(一)回复修复这是较简单的修复方式，一般都能将DNA修复到原样。1.光修复 这是最早发现的DNA修复方式。修复是由细菌中的DNA光解酶(photolyase)完成，此酶能特异性识别紫外线造成的核酸链上相邻嘧啶共价结合的二聚体...
...病毒编码的胸苷激酶（TK）磷酸化，借助病毒DNA多聚酶，掺入病毒DNA中，阻断DNA链的延伸。对编码TK的单纯疱疹，水痘带状疱疹病毒感染有治疗作用，而对不编码TK的巨细胞病毒、EB病毒不敏感。磷酸化的无环鸟苷对宿主细胞DNA多聚酶亲和力较低...
...RnaseH和DNA多聚酶的活性，又可利用引物B合成cDNA的第二链。RNA多聚酶以此双链cDNA为模板转录出与待检RN-一样的RNA，这些RNA又进入下轮循环。RNA多聚酶从一个模板可以转录出10～103个拷贝，因此反应中待检RNA拷贝数以...
...，这样人工在DNA两端做出能互补的共核苷酸多聚物粘性末端，退炎后能结合连接（图20-6），这样方法称为同聚物加尾法。图20-6 同聚物加尾连拉法对平末端的DNA，也可先连上人工设计合成的脱氧寡核苷酸双链接头，使DNA末端产生新的限制内切酶...
...可传给后代。（二）参与复制的酶类DNA的复制过程极为复杂，但其速度甚快，这是由于许多酶参与了复制过程。1．DNA聚合酶（DNApolymerase）。四种脱氧核糖核苷酸（dNTP，N代表A、T、G、C四种碱基）是DNA合成的原料。在原有DNA...
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