...酶活性。第三,DNA探针的标记方法较成熟,有多种方法可供选择,如缺口平移法、随机引物法、PCR标记法等,能用于同位素和非同位素标记。(二)cDNA探针cDNA是指互补于mRNA的DNA分子(complementary DNA)。cDNA是由...
...每一寡核苷酸分子可带有若干个放射性原子,放射性比活度可高达2×1010计数/(min·mg)。附图 DNA聚合酶i Klenow片段标记合成寡核苷酸探针寡核苷酸探针的非放射性标记时,可用以下几种方法:1.酶延伸法合成与探针目的基因的3’-端...
...(一)概述基因诊断是以核酸分子杂交技术为基础,在核酸水平检测人类遗传性疾病的基因缺陷和一些传染病病原体的方法。其基本过程是:制备DNA探针,标记探针,检测样本。开展这项工作的关键是要得到高灵敏度、高特异性的探针。以往人们是用放射性同位素来...
...过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)技术,使免疫细胞化学得到日益广泛的应用。80年代,Hsu等建立了抗生物素-生物素(ABC)法之后,免疫金-银染色法、半抗原标记法、免疫电镜技术等相继问世,使免疫细胞化学技术成为当今生物医学中形态、功能、代谢...
...随机引物标记探针方法 七、异羟基洋地黄毒甙(Digoxigenin)标记核酸探针 八、光敏2,4-二硝基苯(光敏DNP)标记DNA法 九、三硝基苯磺酸(TNBS)标记核酸探针 十、生物素化的RNA探针标记 十一、辣根过氧化物酶标记核酸探针法 ...
...观察时,则要求底物的终末产物具有较高的电子密度。由于辣根过氧化物酶(Horse Radish Peroxidase, HRP)具有稳定性强和反应特异性高等优点,是目前应用最多的酶标记物。实验方法包括酶标记抗体法、非标记抗体酶法和非标记的...
...解离,从而产生游离的5’端标记8核苷酸单链。不被切开的βS杂交体尚可被另一个限制酶Hinf I消化,该酶的识别位点紧靠Del I 识别位点上游。βS杂交DNA经Hinf I消化后,将释出探针DNA的5’末端3核苷酸小片段。βADNA杂交体因...
...过氧化物酶-抗过氧化物酶(PAP)技术,使免疫细胞化学得到日益广泛的应用。80年代,Hsu等建立了抗生物素-生物素(ABC)法之后,免疫金-银染色法、半抗原标记法、免疫电镜技术等相继问世,使免疫细胞化学技术成为当今生物医学中形态、功能、代谢...
...磺酸(TNBS)标记核酸探针 十、生物素化的RNA探针标记 十一、辣根过氧化物酶标记核酸探针法 十二、用聚合酶链反应标记高活性DNA探针 第五节 寡核苷酸探针的制备 参考文献 第二十章 原位杂交组织化学 第一节 原位杂交组织化学概述 一、...
...后,已有取而代之的趋势。生物素标记探针技术是Brigat(1983)首先建立的,它利用生物素标记的探针在组织切片上检测了病毒DNA,通过生物素与抗生物素结合,过氧化物酶-抗过氧化物酶显示系统显示病毒DNA在细胞中的定位。生物素标记探针技术...
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