研究载脂蛋白的前提条件是必须得到各种载脂蛋白的纯品,然而各种载脂蛋白的理化性质、分子量、氨基酸组成及其构象相差很大,因此必须根据各自的特性采用不同的方法进行分离纯化,才能达到获得纯品的目的。有关文献报导,目前分离纯化载脂蛋白方法和仪器种类很多,而常用的方法包括四个步骤即:①分离脂蛋白;②脱脂获得脂蛋白中的载脂蛋白部分即ApoHDL、ApoVLDL、ApoLD...
表12-39 实验动物血清脂蛋 白及 其成分 [60] 实验动物 脂蛋白(毫克/100毫升) 蛋白含量% 总脂质的重量百分比% 游离胆固醇 胆固醇酯 甘油三酯 磷酯 狗 β 86 24 1 2 6 3 α2 99 35 1 3 2 7 α1 758 50 4 23 8 40 兔 β 99 17 3 8 16 10 α2 59 42 1 3 3 8 α1 27...
血浆中蛋白质种类繁多,对各种单一蛋白进行快速而又特异的定量。目前公认的方法是免疫测定法,即利用其特异的抗体,采用测定抗原抗体复合物的方式定量。血浆(清)中载脂蛋白是以脂蛋白形式存在的少量蛋白,在解联剂作用下,使载脂蛋白从脂蛋白中分离出来,再利用相应的载脂蛋白抗体进行测定。 载脂蛋白的免疫测定方法很多,目前采用的方法各有其特点,所需条件也有差异,现将医学检验中...
血浆中脂蛋白有多种,测定其各自的含量对于了解机体正常及疾病过程中脂质代谢状况有重要的临床意义。HDL是一组不均一的脂蛋白颗粒,其胆固醇含量占血浆总胆固醇量的25%~35%。由于血浆中所有脂蛋白均含有胆固醇,因此,只有先分离出HDL才能对其进行定量。分离HDL的方法中,沉淀法是目前临床使用最多的方法,操作简便快速。沉淀法原理是利用多聚阴离子和二价阳离子共同作用...
(一)原理 以琼脂糖凝胶为支持介质,先用脂类染料将血清进行预染,使血清脂蛋白着色,然后电泳。切下各脂蛋白区带,加热溶解,冷却后比色。或者用光密度计直接扫描仪定各区带。计算出α、β-和前β-脂蛋白的相对百分比。 (二)试剂 1.巴比妥HCl缓冲液(pH8.6,离子强度0.075):称取巴比妥钠15.5g,加入1mol/LHCl12ml,混匀溶解,加蒸馏水至10...
一、高密度脂蛋白胆固醇测定
1.用途:无脂蛋白血清(lipoprotein deficient serum,LPDS)主要用于LDL受体活性测定的细胞培养。 2.操作:常规采血,室温放置1~2h,以3kr/min离心10min,分离得到血清。向血清中按每1ml加0.33496g KBr,使其血清密度为d=1.215,或者按等体积加d=1.215的KBr液,按前述两方法铺在血清上面,按4...
LDL是一组不均一的脂蛋白颗粒,其胆固醇含量约占总胆固醇的45%~50%。 测定血浆中LDL,首先同样要分离LDL,其分离方法有超速离心法、聚阴离子沉淀法、色谱法、电泳法及计算法等。以聚阴离子沉淀法简便易于操作,结果准确可靠。由于直接测定LDL有一定的困难,因为它是蛋白质脂类组成的颗状结构,胆固醇是其较为衡定的因素,因此采用测定LDL中所含的胆固醇的浓度作为...
研究载脂蛋白的前提条件是必须得到各种载脂蛋白的纯品,然而各种载脂蛋白的理化性质、分子量、氨基酸组成及其构象相差很大,因此必须根据各自的特性采用不同的方法进行分离纯化,才能达到获得纯品的目的。有关文献报导,目前分离纯化载脂蛋白方法和仪器种类很多,而常用的方法包括四个步骤即:①分离脂蛋白;②脱脂获得脂蛋白中的载脂蛋白部分即ApoHDL、ApoVLDL、ApoLD...
血浆中蛋白质种类繁多,对各种单一蛋白进行快速而又特异的定量。目前公认的方法是免疫测定法,即利用其特异的抗体,采用测定抗原抗体复合物的方式定量。血浆(清)中载脂蛋白是以脂蛋白形式存在的少量蛋白,在解联剂作用下,使载脂蛋白从脂蛋白中分离出来,再利用相应的载脂蛋白抗体进行测定。 载脂蛋白的免疫测定方法很多,目前采用的方法各有其特点,所需条件也有差异,现将医学检验中...
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