...螯合物的荧光,从而有效地消除非特异性本底荧光的干扰。TR-FIA的测定原理见图17-4。以双抗体夹心法为例的测定反应程序见图17-5。其中增强液的作用是使荧光信号增强。因为免疫反应完成后,生成的抗原-抗体-铕标记物复合物在弱碱性溶液中,经...
...染色,结果阴性。(3)抑制试验:同上。(4)阳性对照:同上。如对照(1)、(2)、(3)均呈阴性,阳性对照和待检标本阳性则为特异性荧光。3.补体法(1)自发荧光对照(2)荧光抗体对照(3)抑制试验(4)补体对照:取新鲜豚鼠血清1:10稀释先...
...若切片或其他标本经某种荧光抗体染色后,未获得阳性结果,而又疑有另外的病原体存在时,可用相应的荧光抗体再染色。有时存档蜡块不能再用以切片,也可用存档的HE染色标本,褪去盖片和颜色,再作免疫荧光或其它免疫细胞化学的染色。...
...加1∶20稀释的荧光素标记羊抗人IgG,37℃孵育30分钟,漂洗,吹干,缓冲甘油封片,荧光显微镜下观察。 判定标准:以角质层出现典型的规则的线状或板层状荧光为阳性。 阳性:系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、干燥综合征、系统硬化症、强直性脊柱炎...
...敏感毫升约含10,000,000螺旋体的悬液,置4℃保存备用。有效期约半年。(二)荧光抗体用抗人IgG和IgM荧光抗体。为诊断新生儿先天性梅毒,必须用抗人IgM荧光抗体。所有稀释用PBS 0.1mol/L Na2HPO4-KH2PO...
...水溶去红细胞,待干。加入一滴被检血清于其上,移湿盒中,在室温中30~40min,用0.01mol/lpH7.4PBS洗5~10min,取出吸干,加兔抗人IgG荧光抗体,在湿盒中染色30~45min,再按上法洗片,待干,荧光显微镜检查。阳性者...
...相应的多种标记抗体。(2)间接荧光法:可克服直接法需制备多种荧光抗体的复杂操作。将组织或细胞上的抗原直接与相应抗体(不标记荧光)结合,此为第一抗体,再把能与第一抗体特异结合的荧光标记的抗免疫球蛋白抗体加入,此为荧光标记的第二抗体,观察结果与...
...在不同的肾脏疾病时,荧光标记抗体或免疫酶标记抗体在肾脏内显示的部位、分布情况和型式(pattern)皆有所不同。现根据其在肾脏内显示的不同部位叙述如下:一、肾小球毛细血管壁荧光标记或酶标记抗IgG抗体在肾小球毛细血管壁沉积的型式可分为线...
...第一抗体的已知病人Hp感染阳性血清稀释成1:100包被微板的Hp抗原浓度为2×108mg/ml,按上述步骤和主法进行ELISA试验。结果表明,所标记的羊抗人IgG酶标抗体当稀释度为1:32000~1:512000时,它们的P/N值均为≥...
...约损失50%,因此有些要求不太高的抗体,如抗细菌荧光抗体,不一定要这样处理,可用染色效价测定的稀释法除去非特异性染色。(五)荧光抗体稀释法先测定荧光抗体特异性染色与非特异性染色的效价,若二者效价相差较大,则可将荧光抗体稀释至一临界浓度,使...
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