一、基本原理
一、荧光抗体的制备
1.染色特点 (1)要进行SC和IgA组织定位,必须有相应特异抗血清。SC抗血清国内没有生产。国内商品IgA抗血清的抗原多来自 人乳 中的SIgA,具有双重抗原性(SC和IgA),不能特异进行IgA组织定位,最好采用抗人α-重链抗血清。 (2)SC是糖蛋白,IgA是免疫球蛋白。在组织处理上虽然有人提出用冷冻切片或福尔马林固定胰酶消化的方法,我们的体会用冷酒精...
先测定荧光抗体特异性染色与非特异性染色的效价,若二者效价相差较大,则可将荧光抗体稀释至一临界浓度,使特异性染色呈阳性,而使非特异性染色保持阴性,稀释方法和染色效价测定方法相同。
荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一,制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。
(一)抗体的荧光素标记 用于标记的抗体,要求是高特异性和高亲和力的。所用抗血清中不应含有针对标本中正常组织的抗体。一般需经纯化提取IgG后再作标记。作为标记的荧光素应符合以下要求:①应具有能与蛋白质分子形成共价健的化学基团,与蛋白质结合后不易解离,而未结合的色素及其降解产物易于清除。②荧光效率高,与蛋白质结合后,仍能保持较高的荧光效率。③荧光色泽与背景组织的...
荧光抗体是免疫荧光细胞化学的重要技术之一,制备高特异性和高效价的荧光抗体必须选用高质量的荧光素和高特异性高效价的免疫血清。
荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)是一种间接荧光抗体法。试验前先用Reiter密螺旋体超声波裂解物处理病 人血 清,除去其中具有交叉反应的抗体后,再与 梅毒 螺旋体作用,然后加用荧光素标记的抗人IgG。此法敏感性高、特异性强,能最早检测出梅毒螺旋体的特异性抗体。但操作复杂,且病人经过药物治疗后反应仍持续阳性。因此,不适于判断疗效。如需判定疗效,可参考...
荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS)是一种间接荧光抗体法。试验前先用Reiter密螺旋体超声波裂解物处理病 人血 清,除去其中具有交叉反应的抗体后,再与 梅毒 螺旋体作用,然后加用荧光素标记的抗人IgG。此法敏感性高、特异性强,能最早检测出梅毒螺旋体的特异性抗体。但操作复杂,且病人经过药物治疗后反应仍持续阳性。因此,不适于判断疗效。如需判定疗效,可参考...
可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片,经适当固定或不固定,作免疫荧光染色用。
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