基因检测 是通过 血液 、其他 体液 、或 细胞 对 DNA 进行检测的技术。 基因检测可以诊断 疾病 ，也可以用于疾病风险的预测。疾病诊断是用基因检测技术检测引起 遗传性疾病 的 突变基因 。目前应用最广泛的基因检测是新生儿遗传性疾病的检测、遗传疾病的诊断和某些常见病的辅助诊断。目前有1000多种遗传性疾病可以通过基因检测技术做出诊断。
（一） 试剂 （1） 引物 ：决定 扩增 的特异性。根据检测的 DNA 不同，选用不同引物，每种病原微生 物都有自己特异的引物。 （2）耐热的DNA 聚合酶 ：此酶是从耐热 细菌 中分离出来的，能耐受高温90℃-100℃。 （3）10×PCR 缓冲液 ：500mmol/l KCl;100mmol/LTris-HCl(pH8.4,20℃)150mmol/L M...
聚合酶链反应 （polymerasechain reaction简称PCR）又称无细胞 分子克隆 系统或特异性 DNA 序列体外 引物 定向酶促 扩增 法，是 基因扩增 技术的一次重大革新。可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，从而大大提高对DNA 分子 的分析和检测能力，能检测单分子DNA或对每10万个 细胞 中仅含1个靶DNA分子的样品，因而此方法立即...
（一）特异性高：首次报导的PCR所用的 DNA 聚合酶 是 大肠杆菌 的DNAPolymeraseI的Klenow大片段，其 酶活性 在90℃会变性 失活 ，需每次PCR循环都要重新加入Klenow大片段，同时 引物 是在37℃延伸（聚合）易产生模板—引物之间的 碱基 错配、致特异性较差，1988年Saiki等从 温泉 水中分离到的水生嗜热 杆菌 中提取的热...
（一）模板 核酸 PCR可以以 DNA 或 RNA 为模板进行核酸的体外 扩增 。不过RNA的扩增首先 逆转录 成cDNA后才能进行PCR循环。不同来源的核酸 标本 必须经处理后才能用于PCR的扩增，处理不当或处理过程中DNA掉失都会导致PCR扩增失败。 采集标本 方法不当，未能获得所要检测的靶DNA都会导致出现 假阴性 。但是如果待扩增标本中模板DNA浓度...
在将Taq DNA 聚合酶 引入PCR反应，并使之达到自动化之后，PCR反应已变得十分的简单了。但是PCR样品的采集及制备却并非同样简单，而且，许多PCR的失败都归因于 标本 的制备不当。用于PCR的标本必须经适当处理后才能使用，因为标本中的许多杂质能抑制Taq DNA聚合酶的活性。另外，处理标本可使待 扩增 DNA暴露，能与 引物 复性 。关于PCR标本制...
PCR 扩增 DNA 片段只是一个重要手段。扩增片段的检测和分析才是目的，根据研究对象和目的的不同而采用不同的分析法。 琼脂糖凝胶电泳 可帮助判断扩增产物的大小，有助于扩增产物的鉴定，点杂交除可鉴定扩增产物外，还有助于产物的分型；Southern杂交分析可从非特异扩增产物中鉴定出特异产物的大小，增加检测的特异性与敏感性，最近发展的一系列产物分析法（PCR-E...
所有实验结果都有成功或失败，实验的失败可能是应该出结果而没有出，我们把它称作 假阴性 ，不该出结果而出了结果我们把它称为 假阳性 。PCR实验中最常见的问题就是假阴性和假阳性问题。 （一）假阴性：出现假阴性结果最常见的原因是：Taq DNA 聚合酶 活力不够，或活性受到抑制； 引物 设计不合理；提取的模板质量或数量不过关以及PCR系统欠妥当；循环次数不够。所...
结核分枝杆菌属于 分支杆菌 ，是引发 结核病 的一种 细菌 . 涂片染色具有抗酸性，亦称 抗酸杆菌 。对外抵抗力强，在阴湿处能生存5个小时有以上，但在烈日曝晒下2小时，5－12％来苏水接触2－12小时，70％酒精接触2分钟，或煮沸1分钟，能被杀死。而最简单的 杀菌 方法是将痰吐在纸上直接烧掉。 感染途径 结核菌主要通过呼吸道传播。传染源主要是排菌的肺结核病人...
结核分枝杆菌属于 分支杆菌 ，是引发 结核病 的一种 细菌 . 涂片染色具有抗酸性，亦称 抗酸杆菌 。对外抵抗力强，在阴湿处能生存5个小时有以上，但在烈日曝晒下2小时，5－12％来苏水接触2－12小时，70％酒精接触2分钟，或煮沸1分钟，能被杀死。而最简单的 杀菌 方法是将痰吐在纸上直接烧掉。 感染途径 结核菌主要通过呼吸道传播。传染源主要是排菌的肺结核病人...
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