Felgines等在研究RICO鼠的肝载脂蛋白时报道了抗体法的应用。 用来源于 牛肾 皮质的LDL-R免疫兔,得到兔抗牛-LDL-R抗体,离心法收集纯化细胞膜蛋白,点样于硝化纤维膜上,于猝灭液中温育1h,以TTBS洗3次,加入稀释的抗LDL-R抗体血清,再温育90min,TTBS洗后,纤维膜用结合有 辣根 过氧化物酶的第二抗体羊抗兔-IgG温育1h30min...
为了研究,常需要得到脂蛋白纯品并进一步分离纯化载脂蛋白,迄至目前为止,采用密度梯度超速离心分离纯化各种脂蛋白仍是一种很好的方法。 超速离心法可分为制备型和分析型两种,根据其所用介质密度不同,可以分为等密度离心,密度梯度离心等。根据所用转头的类型不同可以分为角头、甩平头、垂直头和区带头离心法。脂蛋白分离中,采用密度梯度超速离心法较多。 离心作用是根据稳定角速度...
一、超速离心法简介
Felgines等在研究RICO鼠的肝载脂蛋白时报道了抗体法的应用。 用来源于 牛肾 皮质的LDL-R免疫兔,得到兔抗牛-LDL-R抗体,离心法收集纯化细胞膜蛋白,点样于硝化纤维膜上,于猝灭液中温育1h,以TTBS洗3次,加入稀释的抗LDL-R抗体血清,再温育90min,TTBS洗后,纤维膜用结合有 辣根 过氧化物酶的第二抗体羊抗兔-IgG温育1h30min...
Felgines等在研究RICO鼠的肝载脂蛋白时报道了抗体法的应用。 用来源于 牛肾 皮质的LDL-R免疫兔,得到兔抗牛-LDL-R抗体,离心法收集纯化细胞膜蛋白,点样于硝化纤维膜上,于猝灭液中温育1h,以TTBS洗3次,加入稀释的抗LDL-R抗体血清,再温育90min,TTBS洗后,纤维膜用结合有 辣根 过氧化物酶的第二抗体羊抗兔-IgG温育1h30min...
Felgines等在研究RICO鼠的肝载脂蛋白时报道了抗体法的应用。 用来源于 牛肾 皮质的LDL-R免疫兔,得到兔抗牛-LDL-R抗体,离心法收集纯化细胞膜蛋白,点样于硝化纤维膜上,于猝灭液中温育1h,以TTBS洗3次,加入稀释的抗LDL-R抗体血清,再温育90min,TTBS洗后,纤维膜用结合有 辣根 过氧化物酶的第二抗体羊抗兔-IgG温育1h30min...
免疫印迹法(immunoblottingtest,IBT)亦称酶联免疫电转移印斑法(enzymelinkedimmunoelectrotransferblot,EITB),因与Southern早先建立的检测核酸的印迹方法Southernblot相类似,亦被称为Westernblot。免疫印迹法(图15-12)分三个阶段进行。第一阶段为SDS-聚丙烯酰胺凝胶电...
一、原理 定量的抗原加入到含有一定量的相应抗体的琼脂糖凝胶中,在电场作用下,引起抗原抗体的迁移和相互反应,当比例合适时形成肉眼可见的沉淀峰,由于电泳继续进行,样品孔不断有抗原移向抗原抗体复合物的沉淀峰,因抗原过剩使沉淀溶解而在前面又形成新的抗原抗体复合物的沉淀峰。如此反复向前,直到再无游离抗原而反应终止,形成上行火箭状的沉淀峰,其沉淀峰高度和抗原的浓度成正比...
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