(一)质粒DNA的提取及鉴定 1. (1)将2ml含相应抗生素的LB液体培养基加入到通气良好的15ml的试管中,接入一单菌落,于37℃剧烈振荡培养过夜。 (2)将1.5ml培养物倒入1.5ml离心管中,用台式离心机于4℃以12000g离心5min,将剩余的培养物贮存于4℃。 (3)吸尽培养液,使细菌沉淀尽可能干燥。 2.碱裂解法小量抽提质粒 (1)将细菌沉淀...
目前用于放射免疫测定中的分离方法很多,各有其优缺点,下面介绍几种常见的分离方法: (1)吸附分离(固相颗粒) 活性碳吸附剂(目前常用) 硅镁吸附剂( 滑石粉 等) 交换树脂吸附剂 (2)蛋白沉淀剂 硫酸铵、硫酸钠 聚乙二醇(PEG)(目前常用) 无水乙醇、丙醇等 (3)免疫分离剂(第二抗体) (4)磁性分离剂 磁化活性碳吸附剂 磁化固相抗体 (5)固相包被分...
北美 黄连 在国外广泛应用,因而在我国也具有广阔的生产与应用前景。通过对其有效成分的分离与测定,希望对其深入研究起到一定的参考作用。
放射免疫分析时加入的抗原和抗体的量极微,反应所形成的复合物并不能成为肉眼所能辨认的不溶性沉淀物,但是放射免疫分析必须分别测量与抗体结合的(B)和游离的(F)抗原,所以,B、F的分离是放射免疫分析中的一个重要环节 。根据抗原—抗体复合物与游离抗原理化性质或免疫学性质的不同,可采取各种分离技术。
分离方法的选择直接影响分析的质量,通常需满足以下要求: ①使B和F分离完全;②不受外界因素的干扰而影响分离效果;③与游离抗原的非特异性作用尽可能小;④操作简便,分离迅速,重复性好,适用于大量样品分析;⑤来源广,价格低廉,便于使用,适合RIA技术自动化。
...提条件是必须得到各种载脂蛋白的纯品,然而各种载脂蛋白的理化性质、分子量、氨基酸组成及其构象相差很大,因此必须根据各自的特性采用不同的方法进行分离纯化,才能达到获得纯品的目的。有关文献报导,目前分离纯化载脂蛋白方法和仪器种类很多,而常用的方法包括四个步骤即:①分离脂蛋白;②脱脂获得脂蛋白中的载脂蛋白部分即ApoHDL、ApoVLDL、ApoLDL等;③将各种载...
中药生物鉴定法是近年来兴起的中药品质鉴定新方法,它和传统的基原鉴定法、性状鉴定法、显微鉴定法、理化鉴定法一起,并称为中药的五大鉴定法。生物鉴定法具有先进性、适用性、可操作性和专属性强等特征,并且能够突出中药的药效学作用,准确性高。中药生物鉴定法为中药质量现代化和质量标准规范化的研究提供了新思路。但此方法尚处于起步阶段,在具体实施中相关方法和技术还有待于进一步...
核酸存在于多种细胞,如病毒、细菌、寄生虫、动植物细胞;多种标本中,如血液、组织、唾液、尿液等其它来源的标本。因此分离方法复杂而多样。又因各种DNA、RNA的丰度差异,各种分析方法对核酸的纯度与量的要求有差异,因此在实验前应对采用的方法有所了解和选择。总的说来核酸的分离与纯化是在溶解细胞的基础上,利用苯酚等有机溶剂抽提(核酸溶于缓冲液,即水相),分离,纯化;乙...
目的序列与载体DNA正确连接的效率、重组导入细胞的效率都不是百分之百的,因而最后生长繁殖出来的细胞并不同都带有目的序列。一般一个载体只携带某一段外源DNA,一个细胞只接受一个重组DNA分子。最后培养出来的细胞群中只有一部分、甚至只有很小一部分是含有目的序列的重组体(recombinant)。将目的重组体筛选出来就等于获得了目的序列的克隆,所以筛选(dcree...
放射免疫分析时加入的抗原和抗体的量极微,反应所形成的复合物并不能成为肉眼所能辨认的不溶性沉淀物,但是放射免疫分析必须分别测量与抗体结合的(B)和游离的(F)抗原,所以,B、F的分离是放射免疫分析中的一个重要环节 。根据抗原—抗体复合物与游离抗原理化性质或免疫学性质的不同,可采取各种分离技术。
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